Techniques avancées en biologie et médecine
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Abstrait

Méthodes de bioluminescence pour le dosage rapide de l'activité spécifique du vaccin BCG lyophilisé

Natalia N. Ugarova et Galina Yu Lomakina

L'activité spécifique d'un vaccin BCG lyophilisé (UFC/mg de biomasse) est l'une des caractéristiques les plus importantes de ce produit. La méthode microbiologique classique de dosage de l'activité du vaccin BCG prend beaucoup de temps et ne donne des résultats qu'en 4 à 5 semaines. La détermination bioluminescente de l'activité spécifique basée sur l'utilisation du système luciférase-luciférine de luciole permet de raccourcir considérablement la durée du dosage. Depuis les années 1970, la méthode ATP a été appliquée successivement pour étudier l'activité spécifique de différentes souches de BCG. En 2008, la méthode ATP bioluminescente a été proposée et évaluée pour analyser les préparations de vaccins BCG lyophilisés. La durée d'analyse est passée de plusieurs semaines à 2 jours. Cette méthode a été utilisée dans l'étude collaborative internationale visant à évaluer et à établir les réactifs de référence de l'OMS pour le vaccin BCG. En 2016, un nouveau protocole a été publié décrivant l'utilisation de la méthode ATP pour doser l'activité spécifique des vaccins BCG lyophilisés. La durée de l'essai a été réduite à 2 h. Une bonne corrélation entre la valeur de l'UFC et la teneur en ATP intracellulaire a été démontrée.