Andrologie-Open Access
Libre accès
ISSN: 2167-0250
ISSN: 2167-0250
Debjani Nath et Mithun Shaw
Objectif : Les spermatozoïdes caprins (Capra indicus) possèdent une nouvelle protéine kinase indépendante de l'ecto-AMPc (ecto-CIK) à la surface de leur membrane. Cette enzyme a montré une altération remarquable au cours du processus de maturation des spermatozoïdes dans l'épididyme. Nous avons étudié le rôle de la CIK dans la régulation de la motilité vers l'avant des spermatozoïdes épididymaires en contrôlant le niveau intracellulaire de [Ca2+].
Méthode : Les spermatozoïdes matures de la queue de l'épididyme ont été traités avec un anticorps CIK et une inhibition maximale de l'activité enzymatique (85 %) a été observée à 120 minutes d'exposition. Pour analyser les mécanismes d'absorption du calcium, les cellules ont été exposées à 45Ca2+ après traitement avec l'anticorps CIK et prétraitées avec différents régulateurs des canaux calciques. Le signal [Ca2+]i intracellulaire a été déterminé par fluorométrie en utilisant du fura 2-AM. La méthode d'analyse spectrophotométrique informatisée a été utilisée pour mesurer le pourcentage de motilité vers l'avant.
Résultats : Il a été démontré que l'absorption du calcium par les canaux Ca2+ voltage-dépendants de type L de la membrane plasmique est régulée par CIK. Le prétraitement des spermatozoïdes avec du varapamil (20 μM) et de la nifédipine (20 μM) a inhibé de manière significative l'augmentation de [Ca2+]i intracellulaire induite par l'anticorps CIK. Français Alors que les antagonistes de la calmoduline trifluopérazine et w13 (chlorhydrate de N-(4-aminobutyl)-5-chloro-2 naphtalènesulfonamide et azoture de sodium, un puissant inhibiteur mitochondrial, n'ont montré aucun effet sur cette entrée de calcium. Le traitement avec l'ionophore ca A123187 des cellules traitées par l'anticorps CIK a montré une augmentation insensible aux inhibiteurs des canaux de l'absorption du calcium. Il a été observé que le vérapamil (20 μM) joue un rôle significatif dans la diminution (~50 %) de la motilité directe des spermatozoïdes traités par l'anticorps CIK.
Conclusion : Nous avons conclu que CIK est un régulateur important de la motilité directe dans les spermatozoïdes épididymaires et que la régulation peut être activée en partie par le niveau intracellulaire de [Ca2+]i dont l'étendue est fonctionnellement conférée par le canal calcique de type L voltage-dépendant.