Journal d'immunologie clinique et cellulaire
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Abstrait

Deux familles de CGD présentant une mutation hypomorphe dans le domaine d'activation de p67phox

Dirk Roos, Jaap D van Buul, Anton TJ Tool, Juan D Matute, Christophe M Marchal, Bu'Hussain Hayee, M Yavuz Köker, Martin de Boer, Karin van Leeuwen, Anthony W Segal, Edgar Pick et Mary C Dinauer

Contexte de l'étude : La granulomatose chronique (CGD) est une immunodéficience rare causée par un défaut de la NADPH oxydase leucocytaire. Cette enzyme génère du superoxyde, nécessaire à la destruction des bactéries et des champignons par les leucocytes phagocytaires. La plupart des patients atteints de granulomatose chronique (CGD) présentent des mutations dans CYBB, le gène lié au chromosome X qui code pour gp91 ^phox , la sous-unité catalytique de la NADPH oxydase leucocytaire. Nous rapportons ici trois patients atteints de granulomatose chronique autosomique récessive issus de deux familles présentant une mutation homozygote dans NCF2 , le gène qui code pour p67 ^phox , la sous-unité activatrice de la NADPH oxydase.

Méthodes : L'activité de la NADPH oxydase des leucocytes, l'expression des composants de l'oxydase et les séquences génétiques ont été mesurées à l'aide de méthodes standard. La mutation trouvée dans le gène NCF2 des patients a été exprimée sous la forme Ala202Valp67 ^phox dans les cellules K562 pour mesurer son effet sur l'activité de la NADPH oxydase. La translocation du p67 ^phox muté du cytosol des neutrophiles des patients vers la membrane plasmique a été mesurée par microscopie confocale et par Western blot après purification de la membrane.

Résultats : La particularité des patients atteints de CGD A67 rapportée ici est que la mutation p.Ala202Val dans le domaine d'activation de p67 ^phox était clairement hypomorphe : une expression substantielle de la protéine p67 ^phox a été notée et l'activité NADPH oxydase dans les neutrophiles des patients était de 20 à 70 % de la normale, en fonction du stimulus utilisé pour activer les cellules. L'étendue de la translocation Ala202Val-p67 ^phox vers la membrane plasmique pendant l'activation cellulaire était également dépendante du stimulus. Ala202Val-p67 ^phox dans les cellules K562 n'a médié qu'environ 3 % de l'activité oxydase normale par rapport aux cellules transfectées avec le p67 ^phox de type sauvage .

Conclusion : La mutation trouvée dans NCF2 est la cause de la diminution de l'activité de la NADPH oxydase et des problèmes cliniques (légers) des patients. Nous proposons que la mutation p.Ala202Val ait modifié la conformation du domaine d'activation de p67 ^phox , entraînant une activation réduite de gp91 ^phox .