Rapports sur les maladies aiguës et chroniques

Rapports sur les maladies aiguës et chroniques
Libre accès

Abstrait

Conférence sur les maladies tropicales 2019 : ELISA sensible et spécifique pour le diagnostic sérologique des infections à Strongyloides – JM Warnecke - EUROIMMUN AG

JM Warnecke

Introduction : Le nématode Strongyloides stercoralis est l'agent causal de la strongyloïdose, qui peut se manifester chez l'homme par des symptômes dermatologiques, pulmonaires et intestinaux se transformant fréquemment en maladie chronique. Le diagnostic de l'infection par Strongyloides stercoralis est généralement établi par la découverte de larves du parasite dans les joues. La production larvaire est de plusieurs ordres de grandeur inférieure à, par exemple, la production d'œufs d'Ancylostoma duodenal, par conséquent la sensibilité des techniques conventionnelles est faible. La sensibilité est améliorée par des techniques spécifiques, mais l'infection peut toujours passer inaperçue. La strongyloïdose peut être une infection potentiellement grave chez les patients immunodéprimés. Ainsi, la fourniture de méthodes de diagnostic sensibles et spécifiques est souhaitable, en particulier dans le contexte des patients immunodéprimés chez qui le diagnostic et le traitement de la strongyloïdose sont de la plus haute importance. En particulier chez les patients immunodéprimés. Cette étude visait à évaluer les méthodes sérologiques et moléculaires pour le diagnostic de la strongyloïdose humaine dans des échantillons de patients immunodéprimés qui ont été précédemment analysés par des méthodes parasitologiques. Français Dans cette étude, des outils sérologiques et moléculaires ont été utilisés pour diagnostiquer Plusieurs méthodes sérologiques comme la microscopie des selles et les techniques de culture manquent de sensibilité ; la détection d'ADN a démontré des résultats reproductibles avec une sensibilité et une spécificité élevées la détection d'anticorps sériques est considérée comme un substitut pour le diagnostic l'extraction d'ADN a été réalisée selon une méthode précédemment décrite 12 . Brièvement, environ 500 mg d'échantillons de selles conservés dans de l'éthanol à 70 % ont été lavés deux fois dans du PBS. Le culot résultant a été utilisé pour l'extraction d'ADN nous avons évalué la précision de cinq tests sérologiques différents en utilisant également un étalon de référence composite, un nématode largement répandu dans le monde entier, dans des zones où de mauvaises conditions d'hygiène permettent le maintien de sa transmission. Chez l'hôte humain, l'infection est caractérisée par un cycle auto-infectieux, qui peut conduire à un portage à vie du parasite s'il n'est pas traité obtenu en combinant les résultats de différents tests. Le NIE-LIPS récemment développé a donné des résultats pratiquement à 100 % spécifiques, avec une sensibilité > 80 % des infections à Strongyloides. Ici, nous avons évalué les performances analytiques d’un ELISA IgG anti-Strongyloides totalement unique.
Méthodes : Le test ELISA IgG anti-Strongyloides (Euroimmun AG, Lbeck, Allemagne) est basé sur un antigène préparé à partir de S. papillosus. La sensibilité et la spécificité de l'ELISA ont été évaluées idéalement, le test devrait devenir négatif ou montrer systématiquement une diminution marquée du titre dans un délai prévisible après un traitement réussi. Le substrat enzymatique, l'ortho-phénylènediamine avec 0,03 % de peroxyde d'hydrogène dans un tampon citrate phosphate à 0,1 moll/L. Bien que certaines études documentent une baisse du titre d'anticorps après un traitement efficace, plusieurs études soutiennent l'idée que la détection d'anticorps spécifiques au parasite peut être un complément utile au diagnostic parasitologique de Les méthodes immunologiques diagnostiques comprennent le test immuno-enzymatique ; une valeur seuil claire doit encore être définie par rapport à la norme sérologique de référence appliquée à l'Institut de parasitologie de l'Université de Berne, en Suisse. Des tests de diagnostic appropriés sont essentiels à la fois pour repérer les individus infectés par S. stercoralis et pour évaluer la prévalence de l'infection parmi les populations. L'un des principaux problèmes liés à S. stercoralis est que sa prévalence globale est probablement sous-estimée par rapport au panel de sensibilité constitué principalement en raison du manque de sensibilité des tests fécaux qui sont les évaluations les plus couramment utilisées pour l'infection à S. stercoralis. Les tests sérologiques sont également très utiles, mais leur spécificité est variable pour les sérums positifs aux anticorps anti-Strongyloides selon le test ELISA interne de référence. Le panel de spécificité/réactivité croisée comprenait 39 sérums de contrôle classés comme négatifs pour les anticorps anti-Strongyloides ou positifs pour les anticorps contre d'autres parasites, y compris des échantillons de patients atteints d'autres infections parasitaires (Echinococcus, Filaria, Ascaris, Toxocara, Trichinella, Fasciola, Schistosoma, Trichuris, Amoeba, Leishmania, Plasmodium, multi-infection ; n = 25), de patients atteints de cancer (n = 5) et de donneurs de sang sains (n ​​= 9). Les résultats limites ont été considérés comme positifs.
Résultats : Les résultats obtenus à l'aide de l'ELISA anti-Strongyloides étaient en accord avec le test de référence dans 94,6 % (53/56) de tous les échantillons. Dans le panel de sensibilité, l'ELISA anti-Strongyloides les résultats de chaque méthode ont été comparés à ceux des méthodes parasitologiques et le degré de concordance a été déterminé par le coefficient Kappa (k). La signification statistique a été fixée à p < 0,05. était positif dans 16/17 sérums, comme une sensibilité de 94,1 %. Le sérum donnant des résultats discordants le diagnostic de strongyloïdose dépend de l'identification des larves dans des échantillons fécaux par des techniques de concentration ou des cultures a été collecté chez un patient atteint de multiples infections. Parmi les échantillons témoins, une positivité a été trouvée dans 2/39 cas (un patient cancéreux et un donneur de sang), résultant en une spécificité de 94,9 %.

Clause de non-responsabilité: Ce résumé a été traduit à l'aide d'outils d'intelligence artificielle et n'a pas encore été révisé ou vérifié.
Top