Ingénierie enzymatique
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Abstrait

Efficacité thérapeutique de la L-méthioninase comme agent anticancéreux : analyser in silico versus in vivo

Bhawana Kharayat, Priyanka Singh*

La L-méthioninase a une application importante comme médicament anticancéreux chimiothérapeutique dans le secteur pharmaceutique. L'activité catalytique de la L-méthioninase a épuisé l'approvisionnement exogène en L-méthionine en arrêtant la croissance des cellules cancéreuses dépendantes de la méthionine. Dans cette étude, la L-méthioninase a été purifiée à partir d'un bouillon fermenté d'un nouvel isolat bactérien Pseudomonas stutzeri MTCC 101 avec un poids moléculaire (45 kDa), une constante de Michaelis (K _m = 36,5 mM) et une activité maximale (V _max = 500 μmole/min/mg de protéine). Cette enzyme a été résolue en 291 séquences peptidiques après spectroscopie MALDI-TOF/MS. Des études d'amarrage moléculaire et de simulation comme l'approche in silico ont confirmé sa plus grande affinité de liaison envers les substrats L-thréonine et L-méthionine. Le test de spécificité du substrat a confirmé son activité maximale pour un substrat d'acide aminé spécifique L-méthionine. La stabilité conformationnelle élevée de son modèle tridimensionnel avec substrat L-méthionine a été validée en effectuant une analyse in vitro sur des lignées de cellules cancéreuses. Les expériences ont été validées en effectuant une analyse in vitro de cette enzyme contre la croissance de lignées de cellules cancéreuses. Cette enzyme purifiée a montré un bon effet antioxydant contre le cancer hépatocellulaire (Hep-G2) et le carcinome pulmonaire humain (A549) avec une valeur _IC50 de 56 μg/ml et 53 μg/ml respectivement. Cette enzyme pourrait être utilisée efficacement pour la formulation de médicaments anticancéreux thérapeutiques à l'avenir.