Journal de la science cellulaire et de la thérapie
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Abstrait

La gelsoline autologue associée à des nucléotides exogènes améliore la différenciation chondrogénique dans les cellules stromales mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux équin - Une recherche in vitro

Krzysztof Marycz, Monika Maredziak, Agnieszka Smieszek, Jakub Grzesiak and Anna Siudzinska

Contexte : De nos jours, la pratique vétérinaire consiste à traiter les troubles associés à la dégénérescence du cartilage à l'aide d'une thérapie innovante basée sur l'application de cellules stromales mésenchymateuses. La préparation des cellules pour la transplantation nécessite une culture in vitro et une évaluation de leur potentiel chondrogénique.

Objectif : Déterminer si la gelsoline autologue dérivée du sérum équin et des nucléotides exogènes peuvent améliorer l'activité métabolique et la différenciation chondrogénique des cellules stromales mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux équin (EqASC).

Méthodes : Des cellules souches mésenchymateuses ont été isolées à partir de tissu adipeux sous-cutané équin. Le milieu de croissance standard a été complété par 1 % de gelsoline et/ou 0,1 mg/ml de nucléotides. L'activité de prolifération des cellules a été déterminée sur la base des résultats obtenus par un test cytotoxique et une analyse de la perte de microvésicules. La morphologie, l'activité cytophysiologique et le potentiel de différenciation chondrogénique ont été évalués à l'aide de la microscopie optique, de la microscopie à fluorescence et de la microscopie électronique à balayage. Les effets de la stimulation chondrogénique ont été déterminés via (i) l'analyse de l'expression génétique des protéines du cytosquelette et de la matrice ; (ii) l'histochimie des protéoglycanes et (iii) l'analyse du modèle de croissance de la culture et de la formation des chondro-nodules.

Résultats : L'augmentation de l'activité de prolifération a été observée dans les cultures stimulées par des nucléotides exogènes. Bien que l'ajout de gelsoline n'ait pas affecté la prolifération des EqASC, il a contribué à l'intégrité du cytosquelette. Les deux facteurs étudiés ont eu une influence positive sur la différenciation chondrogénique : la gelsoline par la stabilisation de l'expression des protéines du cytosquelette, tandis que les nucléotides ont favorisé la formation de nodules. La combinaison de gelsoline et de nucléotides a amélioré la prolifération cellulaire, ce qui s'est traduit par une activité cellulaire plus élevée et une perte de microvésicules et a influencé la formation de nodules chondrogéniques.

Conclusions : La gelsoline autologue et les nucléotides exogènes mis en œuvre dans les cultures in vitro de cellules souches stromales mésenchymateuses isolées du tissu adipeux peuvent améliorer l'intégrité cellulaire, la prolifération et la différenciation chondrogénique de ces cellules, et pourraient ainsi influencer directement le potentiel régénératif des greffes de cellules souches stromales mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux utilisées pour le traitement de l'arthrose équine.