Journal of Glycomics & Lipidomics
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ISSN: 2153-0637
ISSN: 2153-0637
Syed Qaiser Shah
Français Dans cette étude, le dithiocarbamate de rifabutine (RFND) a été marqué au technétium-99m (99mTc) en utilisant la technique du tricarbonyle. Le RFND marqué a été davantage caractérisé en termes de pureté radiochimique, de stabilité dans la solution saline et le sérum, de liaison bactérienne in vitro, de biodistribution dans des modèles animaux de rats et de précision scintigraphique dans un modèle animal de lapin. Enfin, différentes caractéristiques radiobiologiques du 99mTc(CO)3-RFND ont été comparées au 99mTc-RFN récemment rapporté. Il a été observé que la forme dithiocarbamate du RFN présentait une meilleure pureté radiochimique, une meilleure stabilité dans la solution saline, une meilleure liaison bactérienne, une meilleure biodistribution et une meilleure imagerie ciblée que le 99mTc-RFN récemment rapporté. Ces meilleurs paramètres radiobiologiques ont fait du 99mTc(CO)3-RFND un agent plus fiable pour l'imagerie de la tuberculose. Au cours du siècle dernier, l'une des principales réalisations des scientifiques a été le développement de vaccins et d'antibiotiques qui ont éliminé ou géré dans une large mesure la majorité des maladies infectieuses. Outre ces avancées considérables dans le diagnostic et le traitement des maladies infectieuses, l'infection reste toujours au centre des préoccupations des chercheurs et même de nos jours, l'infection est considérée comme la principale cause de morbidité et de mortalité. En raison des progrès de la pathologie clinique, les maladies infectieuses peuvent être détectées par de simples tests de laboratoire et traitées avec succès avec des médicaments appropriés. Cependant, on observe qu'une grande partie de ces infections entraînant la mort pourrait être due à des conditions difficiles à détecter à ses débuts. Une détection précoce et à temps dans de telles situations pourrait aider à un traitement approprié et donc réduire les risques de décès. La technologie scintigraphique de médecine nucléaire (NMST) offre une alternative différente pour la localisation d'une infection bactérienne suspectée en raison de sa sensibilité plus élevée. En cas d'infection des tissus profonds, d'infection osseuse, d'infections aiguës mettant la vie en danger qui nécessitent une prise en charge précoce appropriée, par exemple l'appendicite, d'infections chroniques graves survenant en raison d'une résistance aux médicaments et d'infections opportunistes chez les personnes immunodéprimées, on pourrait tirer parti de la NMST. Des questions telles que la présence ou non d'une infection et son site, sa gravité et sa cause potentielle pourraient être résolues en utilisant la NMST. Cependant, pour répondre avec précision à ces critères, la condition préalable est un médicament radioactif fiable qui peut s'accumuler au site de l'infection. Le médicament radioactif destiné à la scintigraphie doit répondre aux critères mentionnés ci-dessus, 56 mais il ne doit pas être toxique, montrer une absorption plus élevée dans les zones cibles, une faible dose et un faible coût et une disponibilité facile. Les agents décrits et leurs dérivés ont montré des rapports prometteurs entre la cible spécifique (zone infectieuse) et la non-cible (zone non infectieuse) à ses tout premiers stades, en plus d'un comportement circulatoire et excréteur normal. Cependant, l'apparition de bactéries multirésistantes comme Mycobacterium tuberculosis (MBT), est une menace sérieuse pour les cliniciens qui doivent détecter et gérer de telles infections à un stade précoce. Dans ce schéma, le marquage du dithiocarbamate de rifabutine (RFND) avec 99m Tc a été examiné à l'aide de la technique du tricarbonyle. La faisabilité de la procédure de marquage au tricarbonyle est basée sur le H 2 O mal attaché du précurseur 99m Tc(OH 2 ) 3 (CO) 3 ] + qui peut être facilement substitué. Le RFND marqué a été caractérisé en outre en termes de pureté radiochimique, de stabilité dans la solution saline et le sérum, de liaison bactérienne in vitro , de biodistribution chez des rats modèles animaux et de précision scintigraphique chez des lapins modèles animaux. Enfin, différentes caractéristiques radiobiologiques du 99m Tc(CO) 3 -RFND ont été comparées au 99m Tc-RFN récemment rapporté. La rifabutine (RFN) a été obtenue auprès de Chengdu Yuyang High-Tech Developing Co., Ltd. Chine, et tous les produits chimiques et solvants auprès de Sigma. Français Dans ce travail, on a utilisé la HPLC de Shimadzu, le compteur de puits de Ludlum, le calibrateur de dose de Capintech et la caméra gamma de Nuclearmedizine. La rifabutine (RFN) a été dérivée en dithiocarbamate de rifabutine (RFND) en utilisant la méthode rapportée précédemment 28 . En bref, 0,002 mol de RFND et 2,4 mg de NaOH ont été mélangés dans un flacon propre et stérilisé. Ensuite, 22 ml de tétrahydrofurane (THF) ont été ajoutés au flacon de réaction, puis agités pendant 30 min dans un bain de glace. Ensuite, 2 ml de disulfure de carbone (CS 2 ) ont été ajoutés et le flacon de réaction a été laissé pendant 8 h dans un bain de glace pour une agitation continue. Après cela, le mélange a été traité pour une agitation continue jusqu'à 12 h à température ambiante, suivie d'une récupération par recristallisation. Le RFND a été caractérisé par des techniques spectroscopiques avancées. Synthèse de 99mTc(CO)3-RFND et pureté radiochimique Du pertechnétate de sodium 1 mCi (0,2 ml) a été mélangé à 2 mg (dissous dans 0,4 ml de solution saline normale) de RFND, puis le pH a été ajusté (pH 10) à l'aide de HCL 0,1 mol/L dans un flacon stérilisé rempli d'azote gazeux propre. Ensuite, le mélange a été transféré dans un kit Isolink, puis incubé pour un marquage optimal à 25 °C pendant 15 min. La chromatographie liquide haute performance (HPLC) a été utilisée pour caractériser le 99mTc (CO) 3 -RFND en termes de pureté radiochimique par la méthode décrite précédemment. En bref, 10 µL de 99mTc (CO) 3-Le RFND a été administré au système HPLC équipé d'un détecteur UV fonctionnant à 254 °C, d'un compteur à scintillation de flux, d'une colonne C-18 et d'une pompe binaire. Ensuite, pendant 15 min, à un débit de 1 ml/min, la colonne a été éluée avec de l'eau et du méthanol (W:M). L'effluent a été recueilli dans des flacons séparés, puis compté pour déterminer l'activité. Absorption de Mycobacterium Tuberculosis (MBT) Absorption de MBT de 99m Tc(CO) 3 -RFND a été évaluée en adoptant la méthode décrite précédemment. En bref, 0,8 ml d'acide acétique (0,01 M) contenant environ 1 x 108 unités formant colonie (UFC) de MBT et 0,2 ml de tampon de phosphate de sodium ont été incubés à 4 °C pendant 60 min. Le mélange a été centrifugé à 1 500 tr/min pendant 15 min et après avoir retiré le surnageant, il a été recentrifugé après avoir été suspendu dans 1,5 ml de tampon de phosphate de sodium. Français Par la suite, le surnageant a été retiré à nouveau et les culots bactériens ont été comptés pour déterminer leur activité. Le pourcentage d'absorption in vivo du 99m Tc(CO) 3 -RFND a été évalué chez des rats modèles animaux sains et artificiellement infectés. L'animal a été divisé en deux groupes, à savoir A et B. Aux animaux du groupe A, environ 1 x 108 unités formant colonie (UFC) dans 0,2 ml de solution saline de MBT a été injecté par voie intramusculaire dans la jambe gauche du rat Sprague-Dawley anesthésié (fourchette de poids, 200-250 g) pour créer une infection. Après huit heures, une quantité équimolaire d'huile stérile a été injectée dans la jambe droite du même rat pour créer une inflammation, suivie d'une admission intraveineuse de 0,5 mCi de 99m Tc(CO) 3 -RFND. Aux animaux du groupe B, le processus ci-dessus a été répété sans administration de MBT. Français Par la suite, les rats ont été sacrifiés à différents intervalles après injection intraveineuse de radio-médicament conformément à la procédure de l'Autorité de réglementation nucléaire du Pakistan (PNRA), Comité d'éthique, Commission pakistanaise de l'énergie atomique (PAEC). Par la suite, le % d'absorption in vivo du 99m Tc(CO) 3 -RFND dans un gramme de sang, de rate, d'estomac, d'intestin, de rein, de muscle infecté, de muscle enflammé et normal a été mesuré à l'aide d'un compteur gamma. Imagerie avec 99m Tc(CO) 3-RFND Des lapins sains (poids : 3,0 à 4,0 kg) ont été utilisés pour évaluer le profil d'imagerie du radio-médicament instantané. 0,5 mL de MBT contenant 1 x 10 8 UFC a été injecté dans la patte gauche du lapin sain et après 08 h, 0,5 mL d'huile stérile a été injecté dans la patte droite du même lapin. Enfin, le lapin a été placé face vers le haut sur le lit de la gamma-caméra, puis une injection intraveineuse de 2 mCi de 99m Tc(CO) 3 -RFND a été effectuée. Les images du corps entier ont été acquises à l'aide d'un collimateur à usage général à faible énergie (LEGP) à différents intervalles.