Anatomie et physiologie : recherches en cours
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Abstrait

Rôle de la PKCb dans la transduction du signal du récepteur 1,25D3-MARRS (ERp57/PDIA3) dans l'extrusion du calcium stimulée par les hormones stéroïdes

Sakara Tunsophon et Ilka Nemere

Français La protéine kinase C (PKC) est impliquée dans l'extrusion rapide du calcium médiée par le 1,25(OH)2D3 dans les cellules épithéliales intestinales du poulet. Un rapport précédent a démontré que la redistribution de la PKC a et de la PKC b correspondait à la courbe dose-réponse pour l'extrusion du calcium. Nous avons étudié le rôle de la PKC a et de la PKC b dans l'extrusion du calcium stimulée par les hormones en utilisant l'ARNsi dans des cultures primaires de cellules intestinales. Les résultats ont indiqué qu'il n'y avait pas de changement dans l'extrusion du calcium dans les cellules transfectées avec l'ARNsi de la PKC a, tandis que l'ARNsi de la PKC b a significativement diminué l'extrusion du calcium dans les cellules traitées par le 1,25(OH)2D3 par rapport aux cellules traitées par l'hormone correspondante dans les cellules transfectées et non transfectées ( P < 0,01). Français Des résultats similaires ont également été trouvés en utilisant des inhibiteurs chimiques de la PKC a (safingol) et de la PKC b ([3-(1-(3-Imidazol-1-ylpropyl)-1H-indol-3-yl)-4-anilino-1H-pyrrole-2,5-dione]) dans une suspension de cellules intestinales. Les résultats ont démontré que la PKC b inhibait l'extrusion du calcium (entraînant une augmentation de l'absorption du calcium) à partir des cellules intestinales traitées avec 1,25(OH) 2 D 3 par rapport aux témoins du véhicule ( P < 0,001), le bloqueur de la PKC a n'a montré aucune différence dans l'extrusion du calcium entre les groupes de traitement. En utilisant la microscopie confocale, nous avons réduit l'exposition à l'hormone à 30 secondes afin de visualiser la redistribution de la PKC a et de la PKC b . Français La redistribution rapide de la PKC a s'est avérée augmenter significativement la fluorescence dans la région de la membrane apicale après une exposition de 30 secondes des cellules à 300 ou 650 pM de 1,25(OH)2D3 (P < 0,01 et 0,001, respectivement). En comparaison, l'immunofluorescence de la PKC b s'est avérée augmenter significativement dans la région latérale basale des cellules, par rapport aux témoins après l'exposition des cellules à 300 (P < 0,01) ou 650 pM (P < 0,05) de séco-stéroïde. Les résultats suggèrent que la PKC a est l'isotype de la PKC impliqué dans l'efflux de calcium médié par le 1,25(OH)2D3 dans les cellules épithéliales intestinales.