Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Rôle des différentes régions de l'alpha-synucléine dans l'interaction avec l'acide gras DHA du cerveau

Giorgia De Franceschi et Patrizia Polverino de Laureto

L'α-synucléine est une protéine impliquée dans la maladie de Parkinson. Son interaction avec les acides gras polyinsaturés du cerveau suscite un vif intérêt. Nous avons précédemment étudié l'interaction de l'α-synucléine avec l'acide docosahexaénoïque (DHA), et un effet mutuel entre la protéine monomérique et l'acide gras a été observé. L'α-synucléine acquiert une structure secondaire α-hélicoïdale avec un équilibre rapide entre sa forme libre et sa forme liée aux lipides. Dans la forme α-hélicoïdale, le segment protéique 73-102 est flexible et n'est pas caractérisé par une structure persistante. Le DHA forme des gouttelettes d'huile en présence de la protéine. Pour étudier au niveau moléculaire l'implication de différentes régions de la protéine dans l'interaction avec le DHA, des espèces protéiques tronquées ont été préparées (syn1-99, syn1-52, syn57-102 et syn108-140) et leur capacité à interagir avec le DHA a été analysée par dichroïsme circulaire et cartographie protéolytique. Les données de CD ont montré que tous les peptides, à l'exception de celui correspondant à la région C-terminale, sont capables d'acquérir une structure alpha-hélicoïdale en présence de DHA. Le rapport molaire différent polypeptide/DHA nécessaire pour atteindre le repliement maximal et la teneur différente en hélice finale entre les deux peptides N-terminaux (syn1-99, syn1-52) et le peptide NAC (syn57-102) suggèrent que les répétitions de séquences jouent un rôle important dans la transition de l'hélice alpha et donc dans l'interaction avec le DHA. Les expériences de protéolyse ont montré que toutes les espèces tronquées sont résistantes à la protéolyse en présence de concentrations saturantes de DHA, indiquant que presque tous les résidus sont engagés dans l'interaction avec le lipide. La région C-terminale, en revanche, semble ne moduler que la portion de la molécule enfouie dans le compartiment lipidique. De plus, la capacité des peptides à affecter l'auto-assemblage de l'acide gras a également été analysée, montrant que les peptides qui interagissent modifient également l'état physique du DHA, par le N-terminus chargé positivement.