Journal d'immunologie clinique et cellulaire
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Abstrait

Pertinence de la nitroxydation de l'albumine dans la polyarthrite rhumatoïde : une étude biochimique et clinique

Zarina Arif, Mir Yasir Arfat, Jamal Ahmad, Asif Zaman, Shireen Naaz Islam et M Asad Khan

Objectif : Etudier le rôle de l'albumine sérique humaine modifiée par le peroxynitrite (albumine nitroxydée) dans la polyarthrite rhumatoïde. Méthodes : L'albumine sérique humaine a été exposée au peroxynitrite et les changements de structure de l'albumine ont été surveillés par spectroscopie UV-visible, fluorescence et dichroïsme circulaire, thioflavine T, liaison au rouge Congo et spectroscopie infrarouge à réflexion totale atténuée-transformée de Fourier (ATR-FTIR). Les propriétés antioxydantes de l'albumine nitroxydée ont été évaluées par un test d'hémolyse des globules rouges induite par les radicaux libres. Des marqueurs de l'oxydation des protéines comme le carbonyle, le thiol, la dityrosine et l'hémolyse des globules rouges ont été évalués dans les sérums de patients atteints de PR. La liaison des autoanticorps dans les sérums de PR (n = 50) avec l'albumine nitroxydée a été étudiée par liaison directe, ELISA d'inhibition et test de déplacement de mobilité électrophorétique sur gel. Résultats : L'albumine nitroxydée a indiqué la génération de nitrotyrosine, nitrotryptophane, carbonyle, dityrosine et une réduction de la fluorescence de la tyrosine et du tryptophane et de l'α-hélicité. Les intensités d'émission de fluorescence de la thioflavine T et du rouge Congo ont augmenté lors de la liaison avec l'albumine nitroxydée. De plus, les structures secondaires et tertiaires de l'albumine nitroxydée ont été altérées comme le montrent l'ATR-FTIR, le CD UV lointain et proche. Les autoanticorps dans les sérums de RA (ou les IgG purifiées à partir des sérums) ont montré une liaison améliorée avec l'albumine nitroxydée comme déterminé par liaison directe et ELISA d'inhibition. Les carbonyles protéiques, la dityrosine et l'hémolyse des globules rouges étaient significativement élevés, mais le thiol était significativement faible dans les sérums de RA par rapport au témoin apparié selon l'âge et le sexe. Conclusion : Le peroxynitrite disponible de manière endogène peut nitrater et oxyder l'albumine, conduisant à la nitration/oxydation des protéines et à la formation ultérieure de liaisons croisées, d'agrégats et d'albumine nitroxydée immunogène. Par conséquent, l’albumine nitroxydée peut être un déclencheur potentiel d’autoanticorps chez les patients atteints de PR.