Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Préparation de conjugués de protéines bactériennes marqués à la peroxydase universelle et propriétés de séparation

Ángel Alberto Justiz-Vaillant

L'objectif de cette étude était de produire des conjugués protéiques bactériens chimériques, de les séparer par électrophorèse sur gel de polyacrylamide-dodécyl sulfate de sodium (SDS-PAGE) et d'étudier leurs réactivités avec les immunoglobulines sériques humaines par analyse immunoblot. Des conjugués universels : protéine LA-peroxydase (SpLA-HRP), protéine LG-peroxydase (SpLG-HRP), protéine AG-peroxydase (SpAG-HRP), protéine LAG-peroxydase (SpLAG-HRP) et d'autres ont été préparés par la méthode du periodate. Les conjugués étaient polymères, avec des poids moléculaires (PM) élevés allant de 80-90 kDa à plus de 220 kDa. Tous les conjugués ont un nombre similaire de bandes protéiques. Cependant, SpLALG-HRP et SpLAG anti-IgY-HRP étaient moins polymères. L'analyse immunoblot a montré que tous les conjugués réagissaient avec les Ig sériques humaines. Ces conjugués ont une utilisation potentielle dans les enquêtes épidémiologiques sur les infections zoonotiques affectant les espèces aviaires et mammifères. La méthode du periodate s'est avérée efficace pour produire des conjugués chimériques de protéines de liaison aux immunoglobulines marquées à la peroxydase et l'analyse par immunoblot a montré qu'ils étaient fonctionnels et efficaces pour réagir avec les immunoglobulines sériques humaines.