Ingénierie enzymatique
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Abstrait

Répartition du pepsinogène de l'estomac de la perche rouge (Sebastes marinus) par des systèmes aqueux à deux phases : effets du poids moléculaire et de la concentration du PEG

Lisha Zhao, Suzanne M Budge, Abdel E Ghaly*, Marianne S Brooks et Deepika Dave

Les déchets de transformation du poisson peuvent être utilisés pour produire des sous-produits commercialement précieux, tels que le pepsinogène, qui a des applications dans l'alimentation, les industries manufacturières, l'extraction de collagène, l'extraction de gélatine et dans la régulation de la digestibilité. Une protéase acide importante, la pepsine, est synthétisée et sécrétée dans la membrane gastrique dans un état inactif appelé pepsinogène (PG). Français Dans la présente étude, la purification du pepsinogène de l'estomac de la perche rouge, en utilisant des systèmes aqueux à deux phases (ATPS) formés de polyéthylène glycol (PEG) et de sel à 4°C, a été optimisée. Les effets du poids moléculaire du PEG (PEG 1000, 1500, 3000 et 4000) et de la concentration (16, 18, 20, 22 et 24 %) sur la répartition du PG ont été étudiés, et des paramètres tels que le volume total (TV), le rapport volumique (VR), l'activité enzymatique totale (AE), la teneur en protéines (Cp), l'activité enzymatique spécifique (SA), le coefficient de partage (Kp), le facteur de purification (PF) et le rendement de récupération (RY) ont été évalués. Le poids moléculaire du PEG et la concentration en PEG ont également eu des effets significatifs sur chaque paramètre. TV et VR ont diminué avec l'augmentation de la concentration en sel, car le sel formait des liaisons hydrogène avec les molécules d'eau et formait une structure d'eau plus compacte et ordonnée. Le PG s'est réparti principalement dans la phase supérieure riche en PEG en raison de sa charge négative. Français Les AE, CP, SA, PF et RY ont augmenté avec l'augmentation de la concentration en sel, puis ont diminué, tandis que KP avait une tendance opposée. Les concentrations de PEG 3000 (20 %), PEG 1000 (24 %), PEG 4000 (16 %) et PEG 1000 (18 %) ont donné respectivement les TV, VR, CP et KP les plus élevées. Le PEG 1500 avec une concentration de 18 % a donné les AE, SA, PF et RY les plus élevés (86,2 %). Le PEG 1500 à une concentration de 18 % a donné le RY le plus élevé (86,2 %). Il a été sélectionné comme le poids moléculaire et la concentration de PEG optimaux. (NH4)2SO4 à 15 %, qui a donné le RY le plus élevé (71,7 %), a été sélectionné comme le type de sel et la concentration de sel optimaux. Le PEG 1500 à 15 % (NH4)2SO4 à 18 % était la combinaison ATPS optimale et présentait une meilleure répartition. Les valeurs de SA et PF et RY obtenues avec la méthode ATPS étaient beaucoup plus élevées (2 fois dans le cas de SA et PF, et 1,2 fois dans le cas de RY), que celles obtenues avec la méthode de fractionnement du sulfate d'ammonium (ASF).