Ingénierie enzymatique
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Abstrait

Oligomérisation catalysée par la papaïne en milieu organique aqueux monophasique - Synthèse et caractérisation d'oligomères d'acides aminés neutres et polaires

Srinivasan SK, Kapila S, Daniel F et Nam 

La synthèse des oligopeptides est généralement réalisée dans des milieux réactionnels aqueux ou biphasiques ; l'utilisation de milieux réactionnels monophasiques est assez limitée. Dans cette étude, des homo-oligopeptides de lysine (Lys), de glycine (Gly), de méthionine (Met) et de tyrosine (Tyr) ont été synthétisés par réaction catalysée par la papaïne dans des systèmes monophasiques constitués d'acétonitrile/eau . Les conditions de réaction ont été optimisées pour la formation de liaisons peptidiques et pour minimiser la dénaturation enzymatique. De tels milieux sont particulièrement intéressants car ils peuvent minimiser l'hydrolyse secondaire et inverse du complexe acyle et de l'oligopeptide, respectivement. Les oligopeptides synthétisés ont été purifiés et caractérisés par chromatographie liquide en phase inverse (RPLC) et spectrométrie de masse à ionisation par électrospray (ESI-MS). Les rendements en oligopeptides étaient d'environ 80 % pour tous les acides aminés. La stéréospécificité de la papaïne dans les milieux acétonitrile/eau a également été étudiée. Les énantiomères séparées de la méthionine ont été caractérisées par chromatographie liquide haute pression chirale (HPLC). Les résultats indiquent que la L-spécificité de la papaïne est utilisée dans les milieux monophasiques.