ISSN: 2471-9315
Pintubala Kshetri, Oscar Ningombam et Debananda S. Ningthoujam
Objectif : Isolement de bactéries alcaliphiles productrices de protéases alcalines et optimisation de la production de protéases dans un milieu à faible coût.
Méthodes : L'optimisation de la production de protéase a été réalisée par une approche une variable à la fois (OVAAT) et des approches statistiques utilisant le logiciel Design Expert 6.
Résultats : Neuf (9) souches bactériennes alcalinophiles morphologiquement distinctes ont été isolées. Parmi ces isolats, 6 souches se sont révélées positives pour la production de protéase. Parmi ces souches protéolytiques, Bacillus sp. KW2 a été sélectionné pour des études d'optimisation de la production de protéase. La production optimale de protéase a été observée à 30°C et pH 10,7. Parmi les diverses sources de carbone et d'azote étudiées, le son de riz et la farine de soja se sont révélés être respectivement les meilleures sources de carbone et d'azote. Le plan Plackett-Burman (PBD) a été utilisé pour sélectionner les facteurs de signal qui influençaient la production de protéase. Le son de riz, la farine de soja, l'âge de l'inoculum, le CaCl 2 et la taille de l'inoculum ont donné des effets positifs tandis que KH 2 PO 4 et MgSO 4 ont donné des effets négatifs sur la production de protéase. Les quatre facteurs les plus critiques, à savoir le son de riz, la farine de soja, le chlorure de calcium et le phosphate dihydrogène de potassium ont été sélectionnés pour des études d'optimisation par la méthodologie de surface de réponse (RSM). Les graphiques de surface de réponse ont montré des interactions significatives entre les facteurs et un milieu optimisé final (FOM) a été obtenu après les expériences PBD et RSM. Globalement, une augmentation de 4,8 fois de la production de protéase a été observée après optimisation. Des études sur l'évolution temporelle de la production de protéase par Bacillus sp. KW2 ont révélé que la production maximale de protéase se produisait pendant la phase stationnaire (84 h) de croissance.
Conclusions : La présente étude montre que la production de protéase est fortement influencée par les conditions de culture et les constituants du milieu. Cette étude a également établi que la souche KW2 pouvait produire une protéase alcaline dans un milieu à faible coût contenant du son de riz et de la farine de soja comme principales sources de carbone et d'azote. KW2 et sa protéase pourraient être des agents prometteurs pour des applications biotechnologiques.