Journal des antiviraux et des antirétroviraux
Libre accès

Abstrait

De nouvelles mutations du gène rtM204 dans la polymérase du VHB confèrent une sensibilité réduite à l'adéfovir et au ténofovir

Ke Zhang, Christian Bach, Maria Neumann-Fraune, Yuchen Xia, Bastian Beggel, Rolf Kaiser, Verena Schildgen, Andrea Krämer, Oliver Schildgen et Ulrike Protzer

Contexte : Le traitement de l'infection chronique par le VHB est limité par la sélection de la résistance. Les mutations rtM204I/V du motif YMDD de la transcriptase inverse du VHB sont des déterminants de résistance bien documentés contre la lamivudine et l'entécavir, mais pas contre l'adéfovir ou le ténofovir. Des données phénotypiques systématiques limitées sont disponibles pour ces deux derniers médicaments.

Méthodes : les mutations rtM204 (rtM204A/I/K/L/Q/S/T/V) ont été systématiquement introduites dans des constructions HBV 1,1 fois plus longues et capables de se répliquer, sous le contrôle d'un promoteur CMV. L'aptitude à la réplication virale a été déterminée par qPCR sélective après transfection transitoire normalisée. Les sensibilités in vitro aux médicaments ont été évaluées en déterminant les valeurs IC50 de la lamividune, de l'entécavir, de l'adéfovir et du ténofovir à l'aide d'essais phénotypiques standardisés à haut débit. L'infectiosité a été analysée par infection de cellules HepaRG.

Résultats : Le phénotypage in vitro a montré que le rtM204K conférait une résistance de haut niveau à l'adéfovir et au ténofovir mais altérait simultanément la capacité de réplication. Son aptitude n'a pas pu être restaurée par le rtL180M ou le rtL80I comme décrit pour le rtM204I/V. Le rtM204L et le rtM204Q conféraient une sensibilité réduite de faible niveau à l'adéfovir/ténofovir sans perte de capacité de réplication. Le rtM204A/I/S/T réduisait considérablement la sensibilité à l'un ou l'autre médicament. Il est intéressant de noter que la mutation unique rtM204V a montré une sensibilité significativement réduite aux deux médicaments mais a perdu la résistance en combinaison avec la mutation compensatoire rtL180M. En affectant le gène S chevauchant, les mutants rtM204, à l'exception du rtM204L, ont montré une infectiosité réduite ou diminuée dans les cellules HepaRG.

Conclusions : Nous avons mis au point un test phénotypique rapide et économique et identifié de nouvelles mutations rtM204 conférant une résistance croisée à l'adéfovir et au ténofovir in vitro. Malgré leur faible fréquence dans la population virale, leur importance clinique ne doit pas être sous-estimée en raison de la sélection potentielle de mutations compensatoires, qui peuvent restaurer la forme virale.