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Abstrait

Sélection moléculaire du glycoside de solasodine pour Solanum khasianum à l'aide du gène Fv à chaîne unique anti-solamargine

Waraporn Putalun, Hiroyuki Tanaka, Seiichi Sakamoto et Yukihiro Shoyama

Un anticorps recombinant à fragment de chaîne unique variable (scFv) a été construit à partir de lignées cellulaires d'hybridome exprimant un anticorps monoclonal (MAb) anti-solamargine (As). Les caractéristiques de la protéine As-scFv, exprimée à la fois dans Escherichia coli recombinant et dans la racine velue, étaient presque identiques à celles de l'Ab d'origine. Jusqu'à 220 ng d'As-scFv recombinant ont été produits par milligramme de protéine soluble dans des cultures de racines velues transgéniques de S. khasianum. La concentration en glycosides de solasodine était 2,3 fois plus élevée dans la plante transgénique que dans la racine velue de type sauvage, ce qui reflète le niveau d'As-scFv soluble. La plante S. khasianum recombinante régénérée à partir de racines velues recombinantes contenait une concentration 2,3 fois supérieure de glycoside de solasodine, par rapport à la plante régénérée à partir de racines velues de type sauvage. Ces résultats suggèrent que l'anticorps scFv exprimé dans la plante transgénique contrôle le niveau d'antigène. Cette méthodologie est le premier succès pour la sélection moléculaire de métabolites secondaires, sans compréhension de l'enzyme biosynthétique.