Journal d'immunologie clinique et cellulaire
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Abstrait

Le miR-24 régule la polarisation et la plasticité des macrophages

Jezrom B. Fordham, Afsar R. Naqvi et Salvador Nares

Objectif : Les microARN (miARN) sont des régulateurs omniprésents de la biologie et de l'immunité humaines. Nous avons précédemment démontré un rôle inhibiteur du miR-24 dans la phagocytose des bioparticules d'Escherichia coli et de Staphylococcus aureus et l'induction de la sécrétion de cytokines en réponse au lipopolysaccharide (LPS) de la même origine ; nous avons également identifié des réponses miARN divergentes et convergentes au LPS des pathogènes parodontopathiques Aggregatibacter actinomycetemcomitams (Aa) et Porphyromonas gingivalis (Pg), et révélé que l'extrait de fumée de cigarette est un modificateur environnemental de la structure du Pg LPS (Pg CSE) impactant les réponses miARN des macrophages. Cette étude a été conçue pour étudier le rôle du miR-24 sur la polarisation et la plasticité des macrophages.

Méthodes : Les macrophages humains primaires ont été différenciés des monocytes CD14+ isolés des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) par sélection positive MACS et transfectés avec des mimétiques miR-24, des inhibiteurs ou un mimétique de contrôle négatif ; suivi d'une stimulation avec des cytokines et/ou des LPS dans diverses conditions représentant les étapes clés de l'activation des macrophages. L'activation et la polarisation des macrophages ont été évaluées à l'aide de tests de production de cytokines (ELISA) et d'expression des protéines (cytométrie de flux, immunoblot). L'expression de MiR-24 a été évaluée par RT-PCR.

Résultats : La stimulation des macrophages par des LPS d'origine Aa, Pg et Pg CSE a entraîné des niveaux différents d'expression des cytokines et une expression différentielle du miR-24. La surexpression du miR-24 a inhibé la sécrétion de cytokines en réponse au LPS. L'amorçage des macrophages par l'interféron gamma (IFN-γ) n'a pas surmonté cet effet inhibiteur, mais l'activation classique des macrophages par l'IFN-γ plus TNF-α, TNF-β ou IL-17 a modulé le schéma de suppression médiée par le miR-24 d'une manière spécifique aux cytokines. La surexpression du miR-24 a amélioré la régulation positive du CD206 pendant l'activation alternative des macrophages et a inhibé sa régulation négative dans la transition des macrophages de l'état d'activation alternative à l'état d'activation classique. La surexpression du miR-24 a entraîné une expression réduite de la sous-unité p110 delta de la PI 3-kinase de classe 1A (p110δ).

Conclusion : Les modifications spécifiques du pathogène et de l'environnement dans le LPS modifient l'expression des cytokines et du miR-24 dans les macrophages humains. Le miR-24 est un régulateur négatif de l'activation classique des macrophages par le LPS et favorise l'activation alternative dans des conditions de polarisation et de plasticité. L'inhibition par le miR-24 de la sécrétion de cytokines induite par le LPS dépend de l'état d'activation des macrophages au moment de la stimulation, et cela peut être dû au degré auquel p110δ est impliqué dans la/les voie(s) de signalisation intracellulaire(s) qui transforment la ligature des récepteurs en induction de cytokines. Bien que des différences importantes aient été observées dans l'effet du miR-24 sur les macrophages, ces données indiquent que la surexpression du miR-24 serait principalement anti-inflammatoire.