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Abstrait

Essai immunologique sur microdispositif avec des nanoparticules magnétiques conjuguées pour la détection rapide du peptide citrulliné anticyclique (anti-CCP)

Kenia Chávez Ramos, María del Pilar Cañizares Macías

Les immunotoxines IgG peptidiques citrullinées anticycliques (anti-CCP) sont produites comme une réponse immunitaire en présence de peptides modifiés post-traductionnels appelés peptides citrullinés cycliques (CCP). Les anti-CCP ont été considérés comme des biomarqueurs spécifiques pour l’analyse de la polyarthrite rhumatoïde (PR) et, grâce à leur haute spécificité, il est possible de poser un diagnostic différentiel d’autres maladies rhumatismales. Ces immunotoxines peuvent être détectées dès les premiers stades de la PR et même jusqu'à 10 ans avant de présenter les premiers symptômes de la maladie, ouvrant ainsi une fenêtre d'opportunité pour un traitement rapide. La méthode la plus utilisée pour la détection des anti-CCP est le dosage immunoenzymatique (ELISA). Malgré sa grande sensibilité, l'ELISA est considéré comme un test long. Dans ce travail, un simple microdispositif à canal droit et des nanoparticules magnétiques conjuguées au CCP (MNP-CCP) comme support solide pour quantifier l'anti-CCP ont été développés et sondés pour le plasma. Pour l'analyse spectrophotométrique, un microdispositif doté d'une conception de cellule Z à flux optique couplé à des fibres optiques a été utilisé. Le dosage immunologique sur microdispositif, utilisant seulement 6 L d'échantillon et de réactifs, était presque neuf fois plus rapide qu'une trousse ELISA anti-CCP commerciale, mais des résultats équivalents ont été obtenus. La plage d'identification était de 0,70 à 2000 U mL-1 avec une contrainte de découverte de 0,70 U mL-1 (16 fois plus délicate que ce que l'on pensait sur le paquet ELISA). Le dosage immunologique sur microdispositif, avec des MNP-CCP formés, est une technique simple d'évaluation contre les CCP étant moins coûteuse, plus rapide et plus délicate que la trousse ELISA. Progressivement, des mesures de localisation des immunotoxines peptidiques citrullinées (ACPA) hostiles sont utilisées dans la détermination de la PR. Cet audit résume les prémisses biologiques et l'amélioration des examens ACPA, les mesures ACPA accessibles et leurs attributs de présentation, ainsi que les propriétés analytiques de l'ACPA seul et comparées au facteur rhumatoïde (RF) dans la PR précoce. Nous étudions aussi les relations, l'exactitude, les coûts et la viabilité des coûts, l'accessibilité, la solidité et la reproductibilité des études accessibles. Pris ensemble, les informations montrent que l'ACPA a une particularité plus élevée que la RF pour la PR précoce, une grande légitimité prémonitoire, une affectabilité élevée, un rapport coût-adéquation évident et une grande force et reproductibilité. Compte tenu de ses qualités d'exécution du patron et de son accessibilité croissante, l'ACPA apparaît comme le test le plus précieux pour l'analyse de la RA. La détermination de l'inflammation précoce des articulations rhumatoïdes (PR) dépend de mesures cliniques, notamment des antécédents et des découvertes de tests réels, des installations de recherche et des résultats radiographiques. Des dommages irréversibles surviennent aussi souvent que possible dès le départ dans la PR. Avec de plus en plus de preuves soutenant une analyse précoce et un traitement énergique pour prévenir les dommages et l'incapacité, il est nécessaire d'améliorer l'identification et la détection de la PR précoce. Récemment, les mesures distinguant le facteur rhumatoïde (FR),l'immunotoxine coordonnée contre la partie Fc de l'atome d'immunoglobuline G (IgG), ont été les tests sérologiques essentiels pour la détection de la PR. Les tests contre les agents anti-peptides citrullinés (ACPA), créés et popularisés au cours de la décennie précédente, sont actuellement utilisés en clinique. Étant donné que les ACPA sont présents avant l’apparition des symptômes de la PR et sont prédictifs du développement de la PR, ils constituent un test diagnostique précieux au début de l’évolution de la maladie. Cette revue synthétise les données actuellement disponibles concernant les propriétés diagnostiques du RF et de l'ACPA pour le diagnostic de la PR précoce. Nous nous concentrons sur les ACPA compte tenu de leur développement récent et de leur rôle potentiel dans l’amélioration de l’identification de la PR précoce et indifférenciée. Les données incluses dans cette revue ont été obtenues à partir de recherches dans la littérature médicale, de sites Web et de contacts avec des sociétés commercialisant les tests, ainsi que d'informations et d'opinions obtenues auprès d'experts dans le domaine. Nous avons inclus des informations sur la base biologique et le développement des tests ACPA, les tests disponibles et les données concernant les caractéristiques de performance des tests, en particulier celles publiées dans des revues à comité de lecture, mais également celles publiées par les fabricants. Les propriétés diagnostiques de ces tests, y compris, mais sans s'y limiter, la sensibilité, la spécificité et les valeurs prédictives positives et négatives, sont passées en revue. En 1940, Waaler a observé que le mélange de sérum d'un patient atteint de PR avec des érythrocytes de mouton sensibilisés aux IgG inhibait l'hémolyse, mais provoquait une agglutination cellulaire. Rose et ses collègues ont rapporté plus tard que les sérums de PR agglutinaient davantage les érythrocytes de mouton recouverts d'anticorps anti-érythrocytes de mouton de lapin que les sérums d'individus sains. Ces résultats ont constitué la base du premier test PR, le test Waaler-Rose. Le test d'agglutination mesure uniquement les RF IgM et demeure le test le plus largement utilisé. Les tests d'agglutination sont rapportés sous forme de titres ou d'unités. Les seuils de positivité sont déterminés par les fabricants et basés sur les résultats des patients atteints de PR par rapport à des témoins sains. Les tests d'agglutination ont des sensibilités pour la PR r de 70 à 85 % et des spécificités allant de 40 à 90 %, car une agglutination peut survenir chez des individus sans PR. D'autres tests pour le RF ont été développés, notamment des tests immuno-enzymatiques (ELISA), des tests radio-immunitaires (RIA) et des techniques de néphélométrie laser ou de fréquence. Des tests pour la détection des IgA et IgG RF sont également disponibles. La sensibilité du RF pour le diagnostic de la PR par ces techniques est de 50 à 90 % et la spécificité est de 50 à 95 %. Ces larges fourchettes reflètent les différences dans les populations testées. Des études comparant directement les techniques de détection RF dans des cohortes de patients atteints de PR établie, de témoins sains et de patients atteints de maladies articulaires non inflammatoires ont rapporté que les performances du test d'agglutination au latex étaient similaires à celles de la néphélométrie et des tests radio-immunitaires. Dans une méta-analyse de 50 études de tests RF de 1998 à 2005,les rapports de vraisemblance regroupés (dépendants à la fois des sensibilités et des spécificités) étaient quantitativement similaires pour les tests RF IgM, IgA et IgG, et pour l'utilisation d'un titre RF supérieur ou inférieur pour la positivité. Des résultats RF faussement positifs se produisent généralement dans le cadre d’infections chroniques, de tumeurs malignes et d’autres maladies rhumatismales. La RF est détectée dans le sérum de 1 à 4 % des jeunes en bonne santé et chez un pourcentage plus élevé de personnes âgées sans PR. Cependant, le test RF est largement disponible, relativement peu coûteux et compris à la fois par les médecins de premier recours et les spécialistes de l'arthrite.En 1964, Nienhuis et ses collègues ont décrit un auto-anticorps qu'ils ont appelé facteur anti-périnucléaire. Détecté par essai d'immunofluorescence indirecte sur des cellules de la muqueuse buccale humaine, le facteur antipérinucléaire a reconnu l'antigène présent dans les granules kératohyalines entourant le noyau. Le facteur antipérinucléaire était présent chez jusqu'à 90 % des patients atteints de PR établie, avec une spécificité de 73 à 99 %. Young et ses collègues ont ensuite détecté des anticorps anti-kératine par immunofluorescence indirecte sur des coupes en cri d'œsophage de rat .