Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Réponses MS/MS par chromatographie liquide sur le lentinan pour la caractérisation de la structure du polysaccharide de champignon β-D-glucane

Nor Azreen Mohd Jamil, Noraswati Mohd Nor Rashid et Norasfaliza Rahmad

Le lentinane, un polysaccharide complexe β-D-glucane présent dans le champignon shiitake, est connu pour avoir des effets médicinaux tels que des propriétés anticancéreuses et immunomodulatrices. L'analyse du lentinane par l'application d'instruments de biotechnologie haut de gamme tels que la spectrométrie de masse est encore limitée. Dans cette étude, la chromatographie liquide spectrométrie de masse à temps de vol quadripolaire (LC/MS Q-TOF) a été utilisée pour optimiser la réponse MS/MS dans l'élucidation des caractéristiques du lentinane. L'analyse a été effectuée en utilisant un étalon de lentinane à différentes concentrations via différentes combinaisons de quatre types de colonnes et quatre types de tampons. Quatre niveaux d'énergies de collision MS/MS ou connus sous le nom de dissociation induite par collision (CID) ont été appliqués. Français Les données présentées ont montré que le CID MS/MS optimal qui a généré les six ions produits de lentinane dans la plupart des combinaisons de colonne et de tampon était à 20,0 V. La combinaison de la colonne de chromatographie liquide à interaction hydrophile Altima (HILIC) sans aucun tampon dans la phase mobile (AH ; NB) et de la colonne Hypercarb avec la présence de 0,1 % d'acide acétique dans la phase mobile (TH ; 0,1 % AA) respectivement s'est avérée être la meilleure combinaison parmi d'autres combinaisons car ces combinaisons étaient capables de générer des ions produits de lentinane à une concentration de lentinane aussi faible que 0,156 mg/mL. Cela suggère que ces combinaisons de colonne et de tampon ont donné une bonne sensibilité pour améliorer l'efficacité de pointe de lentinane à faible concentration qui était nécessaire pour atteindre le seuil d'abondance MS/MS. En conclusion, des combinaisons appropriées de colonne et de tampon sont cruciales pour améliorer l'efficacité de pointe de lentinane à une intensité d'ionisation optimale afin de permettre des réponses MS/MS optimales pour l'élucidation de leurs caractéristiques structurelles. La détermination de l’énergie de collision appropriée joue également un rôle important pour générer des spectres MS/MS de tous les ions produits pour le lentinane.