Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Isolement de la plastoquinone à partir d'épinards par HPLC

Marco Malferrari et Francesco Francia

Nous rapportons une méthode de purification de la plastoquinone-9 (PQ), un cofacteur de la prénylquinone impliqué dans la chaîne de transport d'électrons photosynthétique. Les procédures décrites reposent sur l'isolement des épinards-chloroplastes suivi de l'extraction de la PQ et du fractionnement chromatographique. L'extraction de la PQ a été réalisée en utilisant la séparation de la suspension de chloroplastes avec du méthanol:éther de pétrole. Cette procédure élimine de grandes quantités de pigments verts de l'extrait et facilite ainsi l'isolement chromatographique ultérieur de la PQ. Pour obtenir de la PQ pure, l'extraction développée a été combinée à une approche chromatographique en deux étapes utilisant des phases stationnaires orthogonales, c'est-à-dire l'alumine et l'octadécylsilane (C18). Un protocole à petite échelle pour la chromatographie liquide haute performance en phase inverse analytique (RP-HPLC), qui peut être mis en œuvre dans la plupart des laboratoires équipés de systèmes conventionnels, est décrit. La méthodologie rapportée représente un outil précieux pour la production rapide de petites quantités de PQ, pour lesquelles il n'existe pas de normes commerciales disponibles.