Journal des antiviraux et des antirétroviraux
Libre accès

Abstrait

Clones infectieux complets du virus de la marbrure de Calibrachoa (CbMV)

Anju Gulati-Sakhuja et Hsing-Yeh Liu

Des clones d'ADNc complets dérivés de l'ARN génomique (ARNg) et de l'ARN sous-génomique (ARNsg) du virus de la marbrure de Calibrachoa (CbMV) ont été construits sous le contrôle du promoteur de l'ARN T7 et ligaturés dans le plasmide pUC-18. Les transcrits in vitro coiffés et non coiffés, synthétisés à partir du clone d'ADNc génomique complet pUC-CbMV-FL, ont généré des lésions locales chlorotiques sur Chenopodium quinoa inoculé mécaniquement dans les 10 à 15 jours suivant l'inoculation. Les virions de la progéniture récupérés à partir des feuilles symptomatiques inoculées avaient les mêmes propriétés morphologiques que les virions parentaux. Ces virions réagissent également positivement avec l'antisérum CbMV dans le test d'immuno-absorption enzymatique sandwich à double anticorps (DAS-ELISA) et la protéine de l'enveloppe virale a été détectée par Western blot. La présence de cinq cadres de lecture ouverts (ORF) sur le génome du CbMV et la synthèse des protéines correspondantes par les ARNg et les ARNsg ont été confirmées par transfert Northern et traduction in vitro. Le site de départ de la transcription de trois ARNsg du CbMV a également été déterminé. La construction réussie d'un clone d'ADNc infectieux complet du CbMV permet de développer des outils moléculaires qui peuvent être utilisés pour comprendre les fonctions génétiques de ce virus.