Journal des antiviraux et des antirétroviraux
Libre accès
ISSN: 1948-5964
ISSN: 1948-5964
Tao Duan, Monique Ferguson, Lintian Yuan, Fangling Xu et Guangyu Li
La progression de la maladie liée à l'infection par le virus du Nil occidental (VNO) chez l'homme conduit à une méningite ou une encéphalite et peut entraîner la mort, en particulier chez les personnes âgées et immunodéprimées. L'immunité passive utilisant des immunoglobulines s'est avérée efficace dans le traitement de certains patients infectés par le VNO, ce qui rend le développement d'anticorps humains anti-VNO important. L'objectif de cette étude était de construire une bibliothèque de phages display spécifiques de Fab contre le VNO, et d'identifier et de sélectionner des clones ayant des activités neutralisantes. L'ARN total a été extrait des lymphocytes du sang périphérique (PBL) de deux individus immunisés, et la RT-PCR a été utilisée pour amplifier les fragments Fab contenant les chaînes lourdes (VH) et légères (VL). Les gènes amplifiés ont été clonés séquentiellement dans le vecteur d'expression d'anticorps recombinant pComb3-H, et la bibliothèque de phages display spécifique de Fab a été conditionnée avec le phage auxiliaire VCS-M13. Cinq cycles de panning ont été réalisés avec le domaine III de la protéine E du WNV, puis les anticorps de liaison ont été sélectionnés par ELISA.