Journal de la science cellulaire et de la thérapie
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Abstrait

La protéine de choc thermique (HSP) 72 pénètre dans les endosomes précoces en prévision de la libération cellulaire

Punit Kaur et Alexzander Asea

Objectif : Établir le mécanisme par lequel l'hyperthermie induit la libération de Hsp72 dans des peptides spécifiques de la tumeur pour leur livraison aux cellules présentatrices d'antigènes (APC). Matériel et méthodes : Des cellules 4T1 scrb-shRNAGFP et Hsp72-shRNAGFP ont été injectées dans le coussinet mammaire d'une souris BALB/c femelle pour la cinétique de température des souris exposées à la HT en utilisant un ensemble de bain-marie circulant et une hyperthermie médiée par nanocoquille. L'expression intracellulaire de Hsp72 de base et induite par la chaleur a été mesurée par immunoblot avec anti-Hsp72. Quatre heures après le traitement par hyperthermie (HT), la colocalisation de Hsp72 a été déterminée à l'aide d'inhibiteurs et les exosomes ont été récupérés du surnageant et les niveaux de Hsp72 ont été mesurés. La taille de la tumeur a été mesurée après hyperthermie. Résultats : Dans cette étude, nous montrons que la Hsp72 libérée se trouve sous deux formes : 1) dans des exosomes hautement actifs sur le plan immunologique, connus pour être enrichis en complexes du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) de classe I et II, en molécules costimulatrices (CD40, CD80, CD86) et spécifiquement en membres de la famille HSP70 (dont Hsp72, Hsp73, Hsp75, Grp78) et de la famille HSP90 (dont Hsp82, Hsp90, Grp96, Grp98) et, 2) sous forme de Hsp72-PC, dans laquelle la Hsp72 libre chaperonne des peptides spécifiques de la tumeur. De plus, nous montrons que l'exposition des tumeurs porteuses de 4T1 à l'hyperthermie (41°C, 60 min) induit une régression tumorale significative (p<0,05) par rapport aux souris porteuses de 4T1 maintenues à température ambiante (25°C, 60 min). Cependant, l'injection répétée d'anticorps anti-Hsp72 à des souris porteuses de tumeurs 4T1 a annulé la régression tumorale induite par l'hyperthermie. Des échantillons de sang prélevés à différents moments ont confirmé que l'anticorps bloquant réduisait significativement les taux plasmatiques de Hsp72. Conclusions : Nos résultats suggèrent que l'hyperthermie stimule la régression tumorale, en partie, en stimulant la libération de Hsp72 par les tumeurs qui est absorbée par les APC en préparation de l'activation des réponses cytotoxiques CD8+ CTL contre les tumeurs. Étant donné que les HSP sont présentes dans tous les organismes cellulaires, elles sont susceptibles d'être applicables à la prévention/au traitement des maladies des animaux d'élevage. On s'attend à ce qu'elles contribuent à une meilleure compréhension des voies de trafic intracellulaire en tant qu'approche thérapeutique.