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Abstrait

Ingénierie génétique de bactéries capables de produire de l'urate oxydase

Xin Cheng, Bo Yang, Dong Liu, L Juan He, Gan Chen, Yong Chen, R Fa Huang et Y Sheng Jiang

Le gène de l'urate oxydase a été cloné dans Lactobacillus bulgaria pour produire de l'urate oxydase afin de décomposer l'acide urique et de traiter l'hyperuricémie. En utilisant les séquences du gène de l'urate oxydase de Candida utilis (uricase, E12709) sur GenBank, des fragments du gène de l'urate oxydase amplifiés par PCR ont été insérés dans le plasmide pMG36e pour construire le plasmide recombinant PMG36e-U, qui a ensuite été électrotransformé dans Lactobacillus bulgaria. Nous avons utilisé la SDS-PAGE pour identifier l'urate oxydase dans les lysats cellulaires des bactéries génétiquement modifiées et pour mesurer l'activité de l'urate oxydase. Le gène de l'urate oxydase a été amplifié par PCR à partir du génome de Candida utilis. Le plasmide recombinant PMG36e-U contenant le gène de l'urate oxydase a été électrotransformé avec succès dans Lactobacillus bulgaria. Le poids moléculaire de la sous-unité de l'urate oxydase synthétisée par les bactéries génétiquement modifiées était d'environ 34 KD selon SDS-PAGE, et l'activité enzymatique in vitro de la préparation bactérienne était jusqu'à 0,33 u/mL. Conclusion : Le gène de l'urate oxydase a été cloné dans Lactobacillus bulgaria et a décomposé avec succès l'acide urique.