Journal des antiviraux et des antirétroviraux
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Abstrait

Thérapie génique utilisant un fragment variable à chaîne unique sécrété ciblant CCR5 pour inhiber l'infection par le VIH

Alexander Falkenhagen, Masoud Ameli, Sabah Asad, Stanley E Read et Sadhna Joshi

L'interaction du R5 HIV avec le CCR5 cellulaire est obligatoire pour l'entrée dans les cellules hôtes. L'anticorps monoclonal humanisé PRO 140 masque le CCR5 de surface cellulaire et bloque efficacement l'infection par le R5 HIV. Bien qu'il ait été démontré que des administrations hebdomadaires de PRO 140 réduisent considérablement la charge virale chez les patients, des injections fréquentes d'anticorps purifiés ne sont ni pratiques ni rentables. L'ingénierie de cellules ou de tissus modifiés génétiquement pour sécréter des protéines thérapeutiques aux sites de réplication virale peut avantageusement remplacer l'administration continue de médicaments. Nous avons conçu un gène codant pour un fragment variable à chaîne unique sécrété de PRO 140, sscFvPRO140, et avons utilisé un vecteur lentiviral pour son administration et son expression. Le sscFvPRO140 a été efficacement sécrété à partir de cellules modifiées génétiquement, est resté stable dans le surnageant de culture à 37°C et s'est spécifiquement lié aux cellules exprimant le CCR5. Des tests d'infection à cycle unique ont été réalisés pour évaluer l'inhibition de l'infection par le VIH. Le sscFvPRO140 a réduit l'entrée du VIH R5 dans les cellules cibles non modifiées, bien qu'avec une puissance inférieure à celle rapportée pour l'anticorps monoclonal parent. L'entrée du VIH X4, qui utilise CXCR4 comme co-récepteur, est restée inchangée. De plus, l'entrée virale a été considérablement réduite lorsque des cellules cibles du VIH génétiquement modifiées exprimant le sscFvPRO140 ont été infectées. La thérapie génique utilisant des molécules intracellulairement actives, telles que les ribozymes ou les nucléases à doigt de zinc, confère uniquement une protection aux cellules cibles génétiquement modifiées. En revanche, la stratégie de thérapie génique proposée basée sur des protéines anti-VIH sécrétées a le potentiel de protéger les populations de cellules cibles du VIH génétiquement modifiées ainsi que non modifiées.