Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Technique de chromatographie par filtration sur gel comme outil d'étude simple des protéines du plasma séminal chez les animaux domestiques

Vasconcelos Andre Belico de, Oliveira Jamil Silvano de et Lagares Monique de Albuquerque

Le liquide séminal est le composant liquide du sperme, qui constitue un environnement sûr pour les spermatozoïdes. Le plasma séminal a la caractéristique commune à de nombreux autres liquides corporels, caractérisée par une gamme dynamique élevée de protéines, qui visualise les processus physiologiques et biochimiques du sperme. Comme dans d'autres liquides corporels, il est pratique de distinguer dans le plasma séminal les protéines des non-protéines. La technique chromatographique d'exclusion moléculaire présente des points importants pour la préservation des protéines constitutionnelles, en plus du phénomène conventionnel ; les interactions hydrophobes d'exclusion peuvent fournir une résolution plus élevée dans le chromatogramme et ne fournissent pas d'interactions non spécifiques entre les structures protéiques. L'objectif était le profil chromatographique pour une étude simple des protéines du plasma séminal des animaux domestiques (étalons, canidés et caprins), par la technique de chromatographie par filtration sur gel. Français Les échantillons (protéines du plasma séminal) ont été chromatographiés dans un Superose 12 HR 10/30, équilibré avec 25 mMTris-HCl (Sigma) avec 0,15 M NaCl (Sigma), pH 7,4 à température ambiante dans un système de chromatographie liquide à performance rapide (FPLC), en utilisant un débit de 0,5 mL.min-1. Il y a eu une séparation moléculaire de poids moléculaires significativement différents, ce qui rend possible la relation logarithmique entre le poids moléculaire et le volume d'élution. L'étalonnage de la colonne de filtration sur gel a donné lieu à une équation y = ax + b, où les valeurs de a et b étaient respectivement de 5,43 et -2,175, et les erreurs correspondantes étaient respectivement de 0,115 et 0,256. L'erreur expérimentale était inférieure à 5 % pour la plupart des masses moléculaires des protéines. Le travail a montré que la technique de chromatographie par filtration sur gel offrait une excellente répétabilité analytique et pouvait donc être un outil précieux pour l'étude préliminaire du plasma séminal.