Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Validation complète d'une méthode de bioanalyse ICP-MS à haute résolution pour le fer dans le plasma humain avec K2EDTA

Monica Whitmire, Anastasia Osredkar, Jennifer Ammerman, Jeff Biss, Chaoyang Huang, Tracy Marshall, Krista Ehringer et Patricia de Lisio

Objectif : Valider une méthode bioanalytique de spectrométrie de masse à plasma à couplage inductif (ICP-MS) pour la quantification du fer dans le plasma humain avec K2EDTA (matrice). Cette méthode a été validée à l'aide de paramètres de validation bioanalytique typiques. Matériel et méthodes : Les étalons de référence du fer et l'étalon interne au germanium (IS) provenaient d'Ultra Scientific. L'eau réactive avait une résistivité ?18 M?cm. L'acide nitrique et l'acide chlorhydrique étaient de qualité ultra pure. La matrice vierge a été achetée auprès de BioReclamation. La linéarité a été évaluée à l'aide de huit étalons préparés dans une matrice proxy sur une plage équivalente à 0,5-20 ?g de fer/ml de matrice au début et à la fin de chaque série. Des échantillons de contrôle qualité (CQ) ont été préparés en fortifiant la matrice à 0,5, 1,5, 10, 15 et 100 ?g/ml. Un blanc contenant de l'IS et un double blanc ont été inclus dans chaque série. La sélectivité a été évaluée à l'aide de six lots différents de matrice fortifiée avec de l'IS et de l'analyte au niveau LLOQ. Un ICP-MS haute résolution Thermo-Finnigan ELEMENT2 a été utilisé pour analyser les échantillons préparés. Résultats : L'adéquation, la sélectivité, le transfert et la robustesse du système répondaient tous aux critères d'acceptation. La linéarité a été systématiquement démontrée. Les récupérations pour toutes les normes d'étalonnage et les CQ étaient dans les critères d'acceptation. La congélation/décongélation a été démontrée pendant 4 cycles. La reproductibilité sur paillasse a été réussie après 53 heures de stockage à température ambiante. La reproductibilité de la réinjection a été réussie après 96 heures de stockage à température ambiante. La stabilité de l'extrait a été réussie après 190 heures de stockage à température ambiante. La stabilité de la solution IS a été réussie après 29 jours de stockage à température ambiante. La stabilité de la norme d'étalonnage a été réussie après 8 jours de stockage à température ambiante. La stabilité de la solution mère d'analyte a été réussie après 29 jours de stockage à température ambiante. La stabilité au stockage à long terme a été réussie après 31 jours de stockage à une température de 2 à 8 °C, 31 jours de stockage à une température de -15 à -25 °C et 30 jours de stockage à une température de -70 à -90 °C. Conclusion : Cette méthode bioanalytique ICP-MS a été validée avec succès pour la quantification du fer dans le plasma humain avec K2EDTA.