Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Détermination fluorométrique des constituants vitaminiques du plasma humain à l'aide de la chromatographie liquide ultra-performante

Edward C. Bell, Mathew John, Rodney J. Hughes et Thu Pham

Objectif : Une méthode de chromatographie liquide ultra-performante rapide, sélective et sensible a été développée pour la détection et la quantification de plusieurs vitamines dans le plasma humain. Méthodes : L'alpha-tocophérol, le gamma-tocophérol et le rétinol sont dosés à l'aide d'une détection par fluorescence. Les longueurs d'onde d'excitation/émission sont de 295 nm/330 nm et de 325 nm/470 nm pour l'analyse des tocophérols et du rétinol, respectivement. L'acétate de rétinol est utilisé comme étalon interne. La méthode de phase inverse incorpore une élution par gradient avec une phase mobile constituée de méthanol et d'acétonitrile. La séparation des composés vitaminiques est réalisée à l'aide d'une colonne C18 éthyl-hybride pontée. Résultats : Les temps de rétention du rétinol, de l'acétate de rétinol, du gamma-tocophérol et de l'alpha-tocophérol sont respectivement de 1,6 minute, 1,8 minute, 3,9 minutes et 4,3 minutes. Les limites de quantification du rétinol, du gamma-tocophérol et de l'alpha-tocophérol étaient respectivement de 0,02 μg/ml, 0,02 μg/ml et 0,1 μg/ml. Conclusion : La méthode de dosage est adaptée à l'analyse de ces vitamines dans le plasma humain suite à l'ingestion d'aliments enrichis avec ces vitamines liposolubles.