Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Évaluation des forces motrices de la répartition des protéines dans les systèmes aqueux à deux phases PEG-sel et optimisation par la conception d'expériences

Glyk A, Solle D, Scheper T et Beutel S*

Français Dans la présente étude, la répartition de quatre protéines modèles (albumine sérique bovine, ovalbumine, α-chymotrypsine et lysozyme) a été étudiée dans des systèmes aqueux biphasiques (ATPS) de polyéthylène glycol (PEG)-sel en abordant les effets du poids moléculaire (PM) et de la concentration du PEG, du type de sel formant la phase (phosphate de potassium/citrate de sodium (KPP/NaCit)) et de la concentration, de la concentration et du pH en chlorure de sodium (NaCl), ainsi que du PM, du point isoélectrique, de la charge et de l'hydrophobicité des protéines. Il a été constaté que la répartition des protéines était influencée par différents effets coexistants, tels que les interactions hydrophobes et électrostatiques, liés aux paramètres du système et aux propriétés physicochimiques/de surface des protéines. De plus, une analyse rigoureuse et une optimisation des forces significatives pour la répartition des protéines dans le PEG-sel ATPS ont été réalisées par conception d'expériences (DoE). Dans un premier temps, les concentrations de KPP/NaCit, NaCl et PEG ont été considérées comme des facteurs statistiquement significatifs par un plan factoriel fractionnaire. Par la suite, les valeurs optimales des facteurs significatifs ont été déterminées par un plan composite centré sur les faces couplé à une méthodologie de surface de réponse. De plus, des modèles linéaires et quadratiques ont été obtenus dans les plans expérimentaux, respectivement, et évalués par analyse de régression statistique et analyse de variance. Enfin, une validation du modèle quadratique a confirmé une bonne corrélation entre les résultats prédits et expérimentaux, vérifiant ainsi la validité du modèle.