Techniques avancées en biologie et médecine
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ISSN: 2379-1764
ISSN: 2379-1764
Mohammad M Hossain* et Raymond RR Rowland
La glycoprotéine E2 du virus de la peste porcine classique (CSFV) a été exprimée dans un système d'expression de particules réplicons (RP) à base d'alphavirus. Un immuno-essai sur microsphères fluorescentes (FMIA) a été développé pour la détection d'anticorps spécifiques à la protéine E2 du CSFV chez les porcs vaccinés avec la protéine réplicon d'alphavirus. La protéine E2 de pleine longueur du CSFV (aa 1-376) a été fragmentée en plusieurs morceaux et des protéines recombinantes ont été exprimées dans Escherichia coli. Les protéines purifiées ont été conjuguées à des billes de microsphères, les antigènes cibles ont été assemblés en un seul multiplex et testés contre des sérums vaccinés avec des antigènes exprimés par l'alphavirus. Les résultats sont présentés sous forme d'intensité de fluorescence moyenne (MFI) obtenue à partir de la valeur médiane pour au moins 100 microsphères et les valeurs de MFI converties en rapport positif par échantillon (S/P). Parmi les huit protéines E2 recombinantes évaluées dans cette étude, les valeurs de MFI les plus élevées ont été obtenues pour la protéine E2 (aa 1-181). La glycoprotéine E2 du virus de la peste porcine classique a été exprimée dans un système d'expression de réplicon basé sur l'alphavirus. Les résultats montrent que les animaux vaccinés présentaient des IgA, IgG et IgM spécifiques du virus de la peste porcine classique dans le sérum et les liquides oraux. Les valeurs de MFI pour l'échantillon de sérum négatif ont montré une réduction de 20 à 70 fois par rapport à l'échantillon de sérum positif. La réponse des anticorps aux antigènes du virus de la peste porcine classique était IgG>IgM>IgA. Les résultats ont démontré que la détection simultanée des anticorps IgG, IgM et IgA pourrait fournir un outil de diagnostic amélioré.