Ingénierie enzymatique
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Abstrait

Évaluation et caractérisation de la production de protéase par Bacillus Sp. induite par mutagenèse UV

Neha Karn et Santosh Kumar Karn

 Des mutants phénotypiques de Bacillus sp. ont été développés par irradiation UV pour tester leur capacité à améliorer l'activité protéase. Parmi les cinq mutants, RS1 s'est révélé plus efficace que les autres mutants et la souche de type sauvage. La protéase maximale a été obtenue à partir de l'extrait cellulaire de la souche Bacillus sp. RS1, qui a été utilisé pour la purification et la caractérisation. Le filtre de culture de Bacillus sp. RS1 a été purifié par précipitation au sulfate d'ammonium ; le surnageant filtré de culture avait montré l'activité protéase spécifique la plus élevée et contenait 86 % du pourcentage global de protéase de la culture. Une précipitation au sulfate d'ammonium entre 40 et 70 % a été utilisée pour purifier la protéase et a entraîné une augmentation de 20 fois de l'activité spécifique par rapport au surnageant non concentré. La purification sur colonne a entraîné une augmentation de 44 fois de l'activité spécifique par rapport au surnageant non concentré de Bacillus sp. RS1. Sur la base des résultats obtenus, la souche mutante RS1 s'est révélée la plus appropriée pour la purification de l'enzyme protéase. L'enzyme protéase purifiée a une activité maximale à pH 7,0 avec un tampon phosphate et le temps d'incubation optimal était de 24 heures. La protéase isolée de RS1 est stable à pH 8,5 et à température 60°C, de plus cette enzyme peut être exploitée commercialement.