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Abstrait

Différenciation in vitro des cellules souches mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical humain en cellules mélanocytaires, ostéogéniques et neurales

Yanru Zhang

Cette étude visait à isoler et à cultiver des cellules souches mésenchymateuses du cordon ombilical humain (hUMSC) in vitro par fixation de blocs de tissu afin d'étudier leurs caractéristiques biologiques. Les hUMSC ont été cultivées jusqu'au passage 3, après quoi les expériences d'induction ont été réalisées in vitro et induites en mélanocytes, neurones et ostéoblastes. Les résultats de la réaction en chaîne par polymérase à transcription inverse (RT-PCR) ont révélé que l'expression de Nanog Homeobox (NANOG), Pou Class 5 Homeobox 1 (OCT4), 5'-nucleotidase ecto (CD73), molécule CD44 (CD44) dans les cellules souches mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical était positive et le temps de doublement de la population était de 24,7 heures. Les propriétés de différenciation des cellules neurogenèses et ostéogènes ont été confirmées par coloration histologique à l'aide de bleu de toluidine et de rouge d'alizarine. Les mélanocytes ont été détectés par RT-PCR, PCR quantitative (qPCR) et coloration par immunofluorescence. Après 28 jours de différenciation, les cellules présentaient une morphologie typique telle que des cellules bipolaires ou tripolaires avec des dendrites fines. La coloration par immunofluorescence a montré que les cellules différenciées exprimaient le facteur de transcription de la microphtalmie (MITF) et la tyrosinase (TYR), l'expression de MITF, TYR et KIT proto-oncogène récepteur tyrosine kinase (KIT) de 0 jour à 28 jours par qPCR était significativement différente et l'expression des gènes marqueurs MITF, SOX10, KIT par RT-PCR était positive. Les résultats ont démontré que les cellules isolées du cordon ombilical humain étaient des cellules souches mésenchymateuses et que les hUMSC avaient des potentialités de multidifférenciation. Les hUMSC pouvaient également se différencier en mélanocytes in vitro, fournissant des sources fiables de mélanocytes pour le traitement futur du vitiligo.