Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Développement et validation d'une méthode HPTLC pour l'estimation simultanée de la gatifloxacine et de l'ornidazole dans le plasma humain

Ambadas R Rote et Prasanna A Kumbhoje

Une méthode chromatographique simple, rapide, sensible et économique a été développée pour l'estimation simultanée de la gatifloxacine et de l'ornidazole dans le plasma humain en utilisant le diclofénac sodique comme étalon interne. La méthode utilise une plaque CCM de 20 cm x 10 cm pré-revêtue de gel de silice 60F254 d'une épaisseur de 250 μm sur des feuilles d'aluminium. L'échantillon de plasma a été extrait en utilisant du chloroforme:acide formique (4,0:0,4, v/v). La phase mobile utilisée est constituée de méthanol:chloroforme:solution d'ammoniaque [25%] (8,5:1:0,4 v/v/v), avec une saturation de la chambre pendant 20 min à température ambiante. Les valeurs de R f ont été trouvées comme étant (R f = 0,28 ± 0,00178), (R f = 0,77 ± 0,00427) et (R f = 0,50 ± 0,00337) pour GTFX, ORNZ et DICLO respectivement. L'analyse densitométrique a été réalisée à une longueur d'onde de 297,86 nm. La réponse linéaire du détecteur a été observée entre 100 ng/bande et 600 ng/bande pour GTFX et ORNZ. La stabilité de la gatifloxacine et de l'ornidazol dans le plasma a été confirmée au cours de trois cycles de congélation-décongélation (-20 ºC), sur paillasse pendant 12 heures et après préparation après 48 heures. La méthode a été validée conformément aux directives bioanalytiques de la FDA en ce qui concerne la sélectivité, la linéarité, la sensibilité, la précision et l'exactitude, la récupération et la stabilité.