Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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ISSN: 2157-7064
ISSN: 2157-7064
Mulubwa M, Rheeders M, Du Plessis L, Grobler A et Viljoen M
La détermination des concentrations plasmatiques de ténofovir (TFV) dans de petits volumes de plasma et sur une courte période est particulièrement souhaitable dans un contexte clinique. La méthode HPLC -MS/MS a été développée et validée pour la détermination du TFV. Des volumes d'échantillon de plasma de 10 μL ont été extraits par précipitation protéique. La cimétidine, utilisée comme étalon interne (ISTD) et le TFV ont été séparés sur une colonne à phase inverse C18 (Phenomenex Kinetex TM 30 mm × 2,1 mm, 2,6 μm) avec une précolonne. La phase mobile à gradient était constituée d'acétate d'ammonium à 10 mmol/L dans l'eau et d'acétonitrile/méthanol (50:50, v/v). Les temps de rétention du TFV et de l'ISTD étaient respectivement de 0,27 et 0,90 minutes, avec une durée d'exécution de 2 minutes. La transition de l'ion parent à l'ion produit de TFV (m/z 288,072→176,038) et ISTD (m/z 253,13→158,987) a été surveillée en mode d'ionisation positive. Les courbes d'étalonnage étaient linéaires (r2 moyen, 0,9958) sur une plage de concentrations de TFV de 12,5 à 600 ng/mL. La récupération moyenne était de 96,9 %. La précision, l'inter et l'intra-essai de trois contrôles de qualité et la limite inférieure de quantification (12,5 ng/mL) se situaient dans la limite acceptable de < 15 % d'erreur standard relative. TFV était stable dans les conditions étudiées et aucun effet de matrice ni aucun report significatif n'ont été observés. Une méthode distincte, fiable et robuste pour la détermination du TFV dans un petit volume (10 μL) de plasma humain a été développée, validée et incorporée pour déterminer les niveaux plasmatiques de TFV chez 30 femmes infectées par le VIH sous traitement antirétroviral.