Journal des techniques de chromatographie et de séparation
Libre accès

Abstrait

Développement et validation d'une méthode de chromatographie liquide avec détection électrochimique pour la quantification de l'hydroxyurée dans le plasma humain et les solutions aqueuses

Anar Rodriguez, Delphine Beukens, Nicole Debouge, Béatrice Gulbis et Frédéric Cotton

L'hydroxyurée est le seul médicament ayant démontré une efficacité significative dans le traitement de la drépanocytose. Nous avons développé une méthode de chromatographie liquide avec détection électrochimique pour l'analyse de l'hydroxyurée dans le plasma et les solutions aqueuses. Les objectifs analytiques comprenaient une plage analytique de 2 à 50 mg/L, une imprécision totale inférieure à 15 % et une erreur totale inférieure à 30 %. Après précipitation des protéines avec de l'acétonitrile, la séparation a été réalisée sur une colonne C18 Atlantis T3 et éluée avec de l'acétate de sodium 25 mM, de l'acétonitrile 2,5 %, pH 6,5. Le thioacétamide a été utilisé comme étalon interne. La méthode était linéaire pour des concentrations de médicament allant de 0,5 à 50 mg/L et la récupération était comprise entre 100 et 120 %. La précision intra-journalière était inférieure à 6,0 % et la précision inter-journalière était inférieure à 11 %. La limite de détection était de 0,18 et 0,63 mg/L pour la solution aqueuse et le plasma, respectivement, et la limite de quantification était de 1,0 et 1,2 mg/L pour la solution aqueuse et le plasma, respectivement. Aucune interférence de l'urée n'a été observée. La méthode de chromatographie liquide développée peut être utilisée pour les études pharmacocinétiques dans le plasma et d'autres échantillons biologiques tels que la salive ou l'urine. Elle nécessite de faibles volumes d'échantillon et un prétraitement simple et permet une mesure directe de l'hydroxyurée non dérivée.