Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Détermination de la rottlerine, un inhibiteur naturel des protéines kinases C, dans les cellules cancéreuses du pancréas et les xénogreffes de souris par la méthode RP-HPLC

Qing-Yi Lu, Lifeng Zhang, Aurelia Lugea, Aune Moro, Mouad Edderkaoui, Guido Eibl, Stephen J. Pandol et Vay-Liang W. Go

La rottlerine est une cétone polyphénolique naturelle isolée des péricarpes de Mallotus phillippinensis. Dans des études précédentes, nous avons montré que l'administration parentérale de rottlerine réduisait la croissance tumorale dans des modèles murins de xénogreffe de cancer du pancréas. Le but de cette étude était de développer une méthode simple et validée pour la détermination quantitative de la rottlerine dans le plasma et les tissus tumoraux de souris nourries avec un régime à base de rottlerine. Un modèle de xénogreffe de cancer du pancréas a été préparé par injection de 2 × 106 cellules HPAF-II par voie sous-cutanée chez des souris nudes. Une semaine avant l'implantation de la tumeur, les souris ont été réparties au hasard entre un régime alimentaire standard (AIN76A) et un supplément alimentaire standard avec 0,012 % de rottlerine (n = 6 par groupe). Les souris ont été sacrifiées après 6 semaines de régime. La rottlerine a été extraite du plasma et des tissus à l'aide d'une précipitation-extraction de protéines et analysée par la méthode HPLC-DAD en phase inverse. La même méthode HPLC a également été appliquée pour déterminer les niveaux de rottlerine dans les milieux de culture conditionnés et dans les lysats cellulaires de cellules HPAF-II exposées à une concentration de 25 μM de rottlerine. Une quantité substantielle de rottlerine a été détectée dans la tumeur (2,11 ± 0,25 nmol/g de tissu) et dans le plasma (2,88 ± 0,41 μM) chez les souris nourries avec un régime à base de rottlerine. De plus, des niveaux significatifs de rottlerine (57,4 ± 5,4 nmol/mg de protéines) ont été détectés dans les lysats cellulaires de cellules HPAF-II traitées à la rottlerine. Ces données indiquent que la rottlerine est efficacement absorbée dans les cellules et les tissus in vivo et in vitro et suggèrent un fort potentiel pour la rottlerine comme supplément préventif ou adjuvant pour le cancer du pancréas.