Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Détermination de l'allopurinol et de l'oxypurinol dans le plasma canin par chromatographie liquide haute performance avec détecteur ultraviolet : application aux études pharmacocinétiques

Godoy ALPC, De Jesus C, De Oliveira ML, Rocha A, Pereira MPM, Larangeira DF, Lanchote VL, Barrouin-Melo SM

La chromatographie liquide haute performance avec détection ultraviolette (HPLC-UV) a été développée et validée pour la quantification de l'allopurinol et de son métabolite actif, l'oxypurinol, dans le plasma de chien atteint de leishmaniose viscérale zoonotique acquise naturellement. L'allopurinol est un puissant inhibiteur de l'enzyme xanthine oxydase, une enzyme qui catalyse la conversion de l'hypoxanthine en xanthine et de la xanthine en acide urique. En médecine vétérinaire, l'allopurinol est indiqué dans le traitement de la leishmaniose viscérale canine. L'allopurinol est utilisé pour inhiber la synthèse de l'ARN de Leishmania. Les conditions définies pour le développement de l'analyse chromatographique d'échantillons de plasma de chien en utilisant la phase mobile de l'HPLC-UV sont constituées d'un mélange de 0,1 % d'eau, 88 % d'acide formique et 0,25 % d'acétonitrile. L'allopurinol et l'oxypurinol ont été séparés sur une colonne LiChroCART ^® 125-4 LiChrospher ^® 100 RP-8 (5 μm) en utilisant un débit de 0,7 mL min ^-1 et le fonctionnement du détecteur s'est fait à une longueur d'onde de 254 nm. L'acyclovir a été utilisé comme étalon interne. La validation de la méthode HPLC-UV a été déterminée par les limites de détection et de quantification, la linéarité, la reproductibilité et la répétabilité. La méthode avait une limite de quantification inférieure de 0,1 μg.mL ^-1 pour l'allopurinol et l'oxypurinol. L'analyse était linéaire à des concentrations de 0,1 à 20,0 μg.mL ^-1 pour l'allopurinol et son oxypurinol. La valeur de précision intracourant et intercourant pour toutes les concentrations présentées avait une variation de coefficient inférieure à 15 %. Les limites de confiance de la méthode HPLC-UV pour l'analyse de l'allopurinol et de l'oxypurinol dans le plasma canin indiquent que la méthode est applicable à l'étude pharmacocinétique à doses multiples de l'allopurinol chez le chien. Elle est efficace, précise et sensible. Cette étude de recherche pharmacocinétique de l'allopurinol et de l'oxypurinol chez les chiens atteints de leishmaniose viscérale de stade I et II a abouti à des résultats de recherche similaires, corrélés à l'étude sur les chiens en bonne santé.