Ingénierie enzymatique
Libre accès

Abstrait

Activité cytotoxique des peptides dérivés de la parasporine 2Aa1 et de ses analogues contre les cellules SW480 du cancer du côlon

Jennifer Cruz

La parasporine-2 (PS2Aa1) est une toxine produite par Bacillus thuringiensis et elle a montré une cytotoxicité élevée contre les lignées cellulaires cancéreuses telles que : MOLT-4, Jurkat, Sawano et HepG2. En conséquence, pour expliquer son effet cytotoxique, un modèle de mécanisme en plusieurs étapes a été proposé : dans un premier temps, la PS2Aa1 se lie aux récepteurs ancrés au GPI ou à d'autres protéines de la membrane ; ensuite, les toxines concentrées s'oligomérisent, après quoi des pores transmembranaires se forment, générant des dommages à la perméabilité membranaire (1). Cependant, son mécanisme d'action n'a pas été du tout élucidé. Par conséquent, dans ce travail de recherche, nous avons réalisé une fragmentation de la PS2Aa1, en synthétisant des peptides, par une stratégie Fmoc. Nous avons obtenu 3 peptides dérivés de différents domaines de la PS2Aa1 appelés : P264-G274, Loop1-PS2Aa et Loop2-PS2Aa. De plus, 3 dérivés de P264-G274 (P264-V268K, P264-V268W et P264-V268H), 1 dérivé de Loop1-PS2Aa (Loop1-Y5K) et 1 dérivé de Loop2-PS2Aa (Loop2-N4W) ont été obtenus. Les changements dans chaque résidu ont été soutenus par une augmentation de la charge et de l'hydrophobicité des composés. Les structures secondaires des peptides ont été confirmées par des spectres de dichroïsme circulaire (DC). Tous les peptides de PS2Aa1 présentaient une structure secondaire d'hélice α avec une bande d'absorption maximale à 190 nm et deux bandes d'absorption minimales entre 205 et 220 nm. De plus, le degré d'hémolyse des érythrocytes humains a été déterminé montrant que tous les peptides évalués avaient un HC ₅₀ inférieur à 100 µM, avec moins de 24% d'hémolyse par rapport au témoin positif (TX-100 0,1 %). Enfin, les peptides entiers ont montré une activité contre SW480 ; soulignant que P264-V268K était le plus actif avec un IC ₅₀ de 5,716 µM. Le 5-fluorouracile, médicament de chimiothérapie, a été pris comme témoin positif. Ces résultats démontrent clairement que P264-V268K a une grande capacité dans le traitement des cellules cancéreuses du côlon SW480 avec un mode d'action sûr, sélectif et probablement nouveau.