VIH : recherche actuelle
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Abstrait

La distribution cytoplasmique du Tat du VIH-1 sensibilise les cellules T Jurkat à la toxicité induite par la sulfaméthoxazole-hydroxylamine

Kemi Adeyanju, Gregory A. Dekaban et Michael J. Rieder

Contexte : L'un des médicaments les plus fréquemment utilisés par les personnes infectées par le VIH-1 est le sulfaméthoxazole (SMX), un antimicrobien utilisé dans le traitement et la prophylaxie de la pneumonie à Pneumocystis. Cependant, le SMX est responsable d'une incidence très élevée d'effets indésirables d'hypersensibilité (EIM) chez les personnes infectées par le VIH-1. Bien que la physiopathologie des EIM en général soit inconnue, les EIM médiés par le sulfaméthoxazole ont été liés à son métabolite réactif, le sulfaméthoxazole-hydroxylamine (SMX-HA). Nos travaux antérieurs ont montré qu'une expression accrue de la protéine Tat du VIH-1 dans les cellules T était corrélée à une augmentation de l'apoptose après incubation avec le SMX-HA. Dans cette étude, nous avons cherché à déterminer la région de la protéine Tat responsable de cet effet et le mécanisme par lequel Tat contribuait à l'apoptose médiée par le SMX-HA.
Méthodes : Nous avons établi des lignées cellulaires Jurkat T et Cos 7 qui exprimaient de manière stable Tat pleine longueur (Tat101) et des mutants de délétion (Tat86, Tat72, Tat48 et TatΔ). Ces lignées cellulaires ont ensuite été incubées avec SMX-HA et analysées pour déterminer la viabilité cellulaire et la production d'espèces réactives de l'oxygène (ROS). Nous avons en outre utilisé la microscopie confocale pour évaluer la distribution intracellulaire des protéines Tat et pour déterminer si des changements dans l'expression et/ou la localisation de protéines clés du cytosquelette contribuaient à l'apoptose médiée par Tat après traitement par SMX-HA.
Résultats : La suppression de régions de Tat qui conduisent à une augmentation de l'accumulation cytoplasmique a contribué de manière significative à l'augmentation de la mort cellulaire en présence de SMX-HA. L'augmentation de la mort cellulaire n'a pas nécessité l'induction de ROS. L'analyse quantitative a également montré que les lignées cellulaires exprimant Tat avaient des niveaux significativement plus faibles de β-actine et d'α-tubuline présents avant et après traitement par SMX-HA. L'augmentation de la localisation cytoplasmique de Tat est corrélée à des perturbations plus importantes dans la distribution des filaments d'actine.
Conclusion : La présence de Tat cytoplasmique dans les lignées de cellules T et épithéliales augmente leur sensibilité à la mort cellulaire induite par SMX-HA, un effet médié par les 48 premiers acides aminés de TAT.