Journal de la science cellulaire et de la thérapie
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Abstrait

Caractérisation de la stratégie de délivrance de gènes par lipofection facilitée par l'albumine sérique humaine

Robert W Arpke et Pi-Wan Cheng

Nous rapportons la caractérisation d'une stratégie de lipofection facilitée, qui utilise une formulation préparée avec de l'albumine sérique humaine, du DMRIE-C et du pCMV?. Les complexes de transfection dans la formulation de lipofection contenant de l'albumine ont été caractérisés par leur taille par diffusion de la lumière, leur trafic intracellulaire par microscopie confocale et leur mécanisme d'absorption par des inhibiteurs. La supplémentation de la formulation de DMRIE-C plus pCMV? avec de l'albumine augmente l'efficacité de la lipofection de 8 à 9 fois et la taille des complexes de 2 à 2,5 fois telle que mesurée par diffusion de la lumière. L'analyse du trafic intracellulaire des complexes de transfection par microscopie confocale révèle une colocalisation de l'ADN et de l'albumine dans le cytoplasme et le noyau. Le prétraitement des cellules avec de la chlorpromazine ou un excès d'albumine, de cytochalasine B ou de complexes de filipine entraîne une inhibition de l'efficacité de la transfection de 20 %, 55 % ou aucune, respectivement. Les résultats suggèrent une implication modérée de la clathrine, une implication significative de la macropinocytose associée à l'actine et aucune implication des caveolae dans l'absorption des complexes de transfection préparés avec de l'albumine sérique humaine, du DMRIE-C et du pCMV?.