ISSN: 2329-6917
Yihui He, Xiaoyan Chen et Lingying Kong
Contexte : La bêta-hydroxyisovalérylshikonine (bêta-HIVS) est un composé isolé de l'herbe médicinale orientale traditionnelle lithospermum radix. Ce médicament joue un rôle d'inhibiteur non compétitif de l'ATP des protéines-tyrosine kinases (PTK) et présente un grand potentiel pour l'induction de l'apoptose contre les cellules cancéreuses humaines. Nous avons étudié l'effet du bêta-HIVS sur les cellules U266 du myélome multiple et clarifié les détails du mécanisme principal de son activité d'induction de l'apoptose. Objectif : Le but de ce travail était de retracer l'activité d'induction de l'apoptose du bêta-HIVS sur les cellules U266 ainsi que les mécanismes sous-jacents. Méthodes : Le test du kit de comptage cellulaire 8 (CCK-8) et le test de formation de colonies ont été réalisés pour estimer les effets du bêta-HIVS sur la viabilité des cellules U266 et la formation de colonies. L'analyse de l'apoptose a été réalisée sur la base de tests de coloration par fluorescence DAPI et de fragmentation de l'ADN. Français La PCR en temps réel a été utilisée pour évaluer les changements d'expression de l'ARNm de Bcl-2 et Bax, tandis que le test d'immunofluorescence indirecte et le transfert Western ont été utilisés pour valider l'expression de Bcl-2, Bax, la caspase-3, la caspase-9, PARP et le cytochrome c. Résultats : Le test CCK-8 et le test de formation de colonies ont montré que le traitement par le bêta-VIH entraînait une réduction significative de la prolifération cellulaire (P < 0,05 ou 0,01) et de la formation de colonies (P < 0,01). Les résultats de la PCR en temps réel ont indiqué que le niveau d'expression de l'ARNm de Bcl-2 était réduit 72 h après la co-culture du bêta-VIH (P < 0,01), bien que l'ARNm de Bax ait été modifié sans signification. Le test d'immunofluorescence a montré que la caspase-3 était activée dans le groupe traité par le bêta-VIH, accompagnée d'une expression accrue du cytochrome c. Le Western blot a également montré que l'expression de la protéine Bcl-2 dans le groupe traité par le bêta-VIH a diminué et que le cytochrome c a augmenté 72 h après la co-culture. De plus, les caspases 3 et 9, ainsi que PARP ont été activées, toutes avec une valeur de p < 0,01 par rapport aux deux groupes témoins. Conclusion : Le bêta-VIH a révélé une activité remarquable d'induction de l'apoptose dans les cellules U266, peut-être en inhibant la prolifération et en favorisant l'apoptose via la voie mitochondriale.