Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Essai de fractionnement du milieu LB Lennox par chromatographie liquide haute performance en phase inverse

Wenfa Ng

L'analyse du bilan massique est un outil très utile pour l'analyse chimique des processus biologiques. Plus précisément, la composition et les quantités d'entrées dans une cellule pourraient être corrélées avec la mesure des sous-produits métaboliques et des sorties pour déduire les flux métaboliques circulant dans des voies métaboliques cellulaires spécifiques. Cependant, la composition de nombreux milieux de croissance microbiologiques courants reste mal définie avec des variations d'un lot à l'autre. Ainsi, il existe un besoin de développer des méthodes de fractionnement et de séparation efficaces des milieux de croissance courants. En utilisant un extrait de levure à 5 g/L, de la tryptone à 10 g/L et du milieu LB Lennox comme systèmes modèles, ce travail a tenté le fractionnement des trois mélanges de croissance complexes en utilisant la chromatographie liquide haute performance en phase inverse C-18 (RPHPLC). Les résultats n'ont révélé aucun fractionnement efficace des trois mélanges. Plus important encore, les résultats de l'expérience ont indiqué que le choix approprié de la longueur d'onde de détection pour visualiser le chromatogramme faisait une énorme différence dans la compréhension de l'efficacité du fractionnement obtenu. Plus précisément, dans le cas de l'extrait de levure, de la tryptone et du milieu LB Lennox, 194 nm peut être une longueur d'onde de détection plus appropriée que 280 nm. Collectivement, la RP-HPLC C-18 n'a pas été efficace pour séparer 5 g/L d'extrait de levure, 10 g/L de tryptone et du milieu LB Lennox avec des phases mobiles hydrophiles (mélange éthanol/eau).