Journal d'ophtalmologie clinique et expérimentale
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Abstrait

Profils d'expression et de méthylation de l'ADN altérés du gène ERCC6 dans le tissu cristallinien de la cataracte corticale liée à l'âge

Yong Wang, Guowei Zhang, Fei Li, Lihua Kang, Jindong Ben, Han Rong et Huaijin Guan

Les dommages à l'ADN induits par les ultraviolets (UV) sont attribués à la pathogenèse de la cataracte liée à l'âge (ARC) et sont réparés via la réparation par excision de nucléotides (NER). Il est connu que la protéine du groupe de complémentation B du syndrome de Cockayne (CSB) codée par ERCC6 est un composant du complexe NER. La méthylation de l'ADN est l'un des principaux événements épigénétiques et est catalysée par les ADN 5-cytosine-méthyltransférases (DNMT). Cette étude visait à examiner la contribution potentielle de la méthylation de l'ADN des îlots CpG dans la région promotrice d'ERCC6 dans les tissus du cristallin à la pathogenèse de l'ARC. Quinze lentilles de type cortical ARC et quinze lentilles transparentes de sujets humains ont été incluses dans cette étude. L'expression d'ERCC6 et de DNMT dans les lentilles a été analysée par qRT-PCR et western blot. Une PCR à séquençage au bisulfite (BSP) a été réalisée pour évaluer l'état de méthylation d'ERCC6. Une expérience in vitro en ajoutant un agent déméthylant 5-aza-2'-désoxycytidine (5-aza-dC) dans l'épithélium cristallinien humain B-3 (HLE B-3) a été menée pour confirmer le rôle de la méthylation de l'ADN dans l'expression d'ERCC6. Les résultats montrent que les niveaux d'ARNm et de protéines d'ERCC6 ont été significativement réduits dans les LEC et le cortex cristallinien des ARC. L'ARNm de DNMT3b était significativement plus élevé dans les LEC des ARC que dans celui des témoins. Dans le groupe ARC, l'îlot CpG dans la région promotrice d'ERCC6 a montré une hyperméthylation dans les LEC par rapport à celui des témoins. Après traitement avec 5-aza-dC, le niveau de protéine ERCC6 a augmenté dans HLE B-3. Nous avons conclu que la surexpression de DNMT3b dans le cristallin est associée à l'hyperméthylation de l'îlot CpG d'ERCC6, qui est liée à l'expression réduite d'ERCC6 dans les LEC des patients ARC. Ce changement épigénétique dans le gène ERCC6 pourrait être un facteur de formation d’ARC médiée par une réparation de l’ADN altérée.