Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Méthode de spectrométrie de masse en tandem par chromatographie liquide sensible et sans interférence pour mesurer les métanéphrines dans le plasma

Jessica Gabler, Chao Yuan, Witold Woroniecki, Huafen Liu et Sihe Wang

Contexte : Les métanéphrines plasmatiques sont les principaux biomarqueurs utilisés pour aider au diagnostic du phéochromocytome. Cependant, les faibles niveaux physiologiques de métanéphrines, les propriétés physicochimiques et les interférences potentielles rendent difficile l'obtention d'une sensibilité et d'une spécificité élevées. Dans ce rapport, nous avons développé et validé une méthode de chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS) sensible et sans interférence pour mesurer les métanéphrines plasmatiques avec une préparation d'échantillon simple.

Méthodes : Les échantillons de plasma ont été extraits à l'aide de cartouches d'extraction en phase solide à échange de cations faibles et analysés par LC-MS/MS avec un temps de cycle analytique inférieur à six minutes.

Résultats : Une suppression absolue des ions et un effet de matrice ont été observés, mais ils ont été complètement compensés par les étalons internes. L'épinéphrine, un interférent isobare de la normétanéphrine, a été séparée par chromatographie et aucune interférence n'a été observée avec d'autres interférents courants. La méthode était linéaire de 0,08 à 22,2 nmol/L pour la normétanéphrine et de 0,03 à 8,2 nmol/L pour la métanéphrine avec une précision allant de 81 à 107 %. Aucun report n'a été observé jusqu'à 56,8 nmol/L pour la normétanéphrine et 8,7 nmol/L pour la métanéphrine. Les CV intra-essai et totaux étaient dans les limites de 6,8 % pour la normétanéphrine et de 5,2 % pour la métanéphrine pour les trois niveaux testés. D'après la régression de Deming, la comparaison avec une méthode LC-MS/MS de référence utilisant des échantillons de patients (n = 40) a montré une
pente de 0,973, une interception de 0,11 nmol/L et un coefficient de corrélation de 0,9936 pour la normétanéphrine et une pente de 1,039, une interception de -0,014 nmol/L et un coefficient de corrélation de 0,9914 pour la métanéphrine. La différence moyenne était de 3,5 % et de -1,6 % pour la normétanéphrine et la métanéphrine, respectivement.

Conclusion : Ce test LC-MS/MS est sensible et exempt d'interférences pour la quantification des métanéphrines plasmatiques