Journal des antiviraux et des antirétroviraux
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Abstrait

Un nouveau test de criblage à haut débit pour identifier les inhibiteurs de l'interaction de la protéine gp120 du VIH-1 avec DC-SIGN

Thuong H. Tran, Rasha El Baz, Andrea Cuconati, James Arthos, Pooja Jain et Zafar K. Khan

Selon le rapport 2010 de l'ONUSIDA, environ 34 millions de personnes vivent avec le virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1), malgré une thérapie antirétrovirale hautement active (HAART). Malgré son efficacité, la thérapie ARV présente de nombreux inconvénients, notamment une trajectoire de coût insoutenable pour les pays économiquement défavorisés, des effets secondaires graves et le développement de souches résistantes aux médicaments. Plusieurs mesures sont en cours pour développer des alternatives à la thérapie ARV, en particulier pour le contrôle de l'infection précoce par le VIH-1, mais le manque de cibles et de tests médicamenteux efficaces entrave la recherche de molécules ARV potentielles. Les cellules dendritiques présentes dans le tissu muqueux, ainsi que les lymphocytes T CD4+ et les macrophages, sont parmi les premières cellules à rencontrer le VIH-1. La molécule DC-SIGN (Dendritic Cell-Specific Intercellular Adhesion Molecular Molecular Grabbing Nonintegrin) joue un rôle crucial dans la liaison du VIH-1 par le biais d'une interaction à haute affinité avec la glycoprotéine d'enveloppe virale gp120. DC-SIGN, une lectine de type C se liant au mannose exprimée sur les cellules des muqueuses du rectum, de l'utérus et du col de l'utérus, facilite l'infection précoce par le VIH-1 après une transmission sexuelle. Dans cette étude, nous rapportons un nouveau test de criblage à haut débit (HTS) spécifique à la cible capable de quantifier la liaison ainsi que l'inhibition de DC-SIGN et de gp120. La spécificité du test a été déterminée par inhibition compétitive tandis que l'optimisation a eu lieu pour la tolérance au DMSO (0,5 %), le facteur Z' (0,51), le rapport signal/bruit (3,26) et le coefficient de variation (5,1 %). Pour la validation du test, des antagonistes précédemment reconnus de la liaison DC-SIGN/gp120 ont été testés pour détecter l'inhibition démontrant la pertinence du test pour le futur criblage HTS d'inhibiteurs potentiels qui bloquent la liaison entre DC-SIGN et gp120, ce qui peut prévenir une infection précoce par le VIH-1.