Journal des techniques de chromatographie et de séparation
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Abstrait

Une nouvelle solution d'O-phtaldialdéhyde (OPA) pour la détection de groupes aminés par HPLC par fluorescence sans préparation à l'acide borique

Gilberto Joao Padovan, Izabel Arruda Leme, Priscila Giacomo Fassini, Nelson Iucif Junior et Julio Sergio Marchini

Traditionnellement, l'o-phtaldialdéhyde (OPA) est préparé avec un tampon borate pour les réactions pré- et post-colonne. L'objectif de cette étude était de montrer que la préparation d'OPA pour la détection de groupe amine HPLC en utilisant de l'eau alcalinisée (pH 10,4), au lieu de l'acide borique, est méthodologiquement réalisable, donnant des résultats similaires à ceux obtenus avec l'acide borique. Cette procédure peut éliminer une éventuelle précipitation du système de ligne, comme au niveau du détecteur de cuvette et dans la ligne de tubulure après la connexion en « T ». Une autre caractéristique importante de cette procédure est qu'elle élimine le risque potentiel d'empoisonnement au borax chez les utilisateurs. La sensibilité du signal de détection n'a pas du tout changé. Une polyamine standard et une amine biogène ont été utilisées pour les préparations d'OPA et l'analyse HPLC. Le coefficient de corrélation (r) était de 0,97 et la récupération d'environ 90 % pour les préparations d'eau et de tampon borate. Le coefficient de variabilité inter-essai (CV) pour les procédures à l'eau et au borate variait de 7,9 à 15,2 % et le CV intra-essai variait de 1,8 à 5,9 %. Par conséquent, l'eau peut remplacer avantageusement l'acide borique dans le processus OPA. Par conséquent, l'utilisation d'eau à la place de l'acide borique dans la préparation de l'OPA entraîne une moindre contamination des résidus environnementaux par les détritus HPLC, tout en éliminant le risque futur d'empoisonnement à l'acide borique.