Ingénierie enzymatique
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Abstrait

Un peptide humain protège contre la leucémie induite par la thérapie

R. Wiehe

Le traitement du cancer par la doxorubicine et l'étoposide augmente le risque de réarrangements dans le gène de la leucémie à lignée mixte ou de la leucémie myéloïde/lymphoïde (MLL) [1-3], englobant une région de cluster de points de rupture de 7,3 kb (MLLbcr) sur le chromosome 11 avec un point chaud de 0,4 kb lié au traitement [2]. Il a été démontré que l'enzyme mitochondriale endonucléase G (EndoG) s'accumule dans le noyau après un traitement génotoxique induisant un stress de réplication où elle clive le MLLbcr [4]. Un plasmide rapporteur basé sur GFP imitant les réarrangements MLLbcr a été conçu [5] et utilisé pour cribler une bibliothèque de peptides hémofiltrés lyophilisés fractionnés provenant de patients atteints d'insuffisance rénale chronique dans le but d'identifier un peptide humain empêchant les réarrangements MLLbcr. Ainsi, les cellules ont été prétraitées avec des peptides suivis d'une exposition à l'étoposide ou à la doxorubicine et d'une analyse FACS pour détecter la reconstitution de GFP. Après deux cycles de fractionnement chromatographique et d'analyse par spectrométrie de masse, nous avons identifié un peptide qui atténue les réarrangements de MLLbcr dans différents types de cellules sans affecter le cycle cellulaire ou la mort cellulaire (image). La microscopie par immunofluorescence et l'immunoprécipitation de la chromatine ont révélé que le peptide inhibait l'accumulation d'EndoG nucléaire et la liaison de MLLbcr, alors que les dommages globaux à l'ADN n'étaient pas influencés par le peptide. Pris ensemble, nous décrivons un peptide humain empêchant les réarrangements de MLLbcr en interférant avec les fonctions d'EndoG nucléaire.