Journal de pharmacie appliquée
Libre accès

Abstrait

Une stabilité en quatre dimensions (4D) indiquant l'optimisation de la méthode analytique et la prédiction de l'essai de puissance à l'aide du suivi des pics MS et UV

Blasko A, Tam J, Ahmad IAH, Gunasekera S, Oshchepkova I, Galin, Andrey Vazhentsev A, Tashlitsky V et Adams D

Au total, 60 pics générés par la dégradation forcée de trois principes pharmaceutiques actifs (API) ont été utilisés pour la sélection des colonnes dans le cadre du développement d'une méthode analytique HPLC-UV indiquant la stabilité en utilisant le suivi des pics LC-UV et LC-MS. Deux additifs de phase mobile et deux modificateurs organiques ont été évalués lors du criblage d'une liste de colonnes de chromatographie soigneusement choisies. Le criblage de la colonne a été utilisé et la meilleure colonne a été sélectionnée en fonction du nombre total de pics résolus, des résolutions, des largeurs de pic et des formes de pic. 0,1 % de TFA dans ACN/eau a été utilisé pour le criblage initial et l'optimisation du profil de gradient. Trois concentrations différentes de TFA dans ACN/eau ont également été évaluées. La concentration optimale de TFA, 0,10 % (8,77 mM), a été considérée comme optimale pour une optimisation ultérieure du gradient en fonction de la résolution des paires critiques. Après la sélection de la colonne, de la phase mobile et de la sélection du modificateur de phase mobile (TFA), l'optimisation du gradient a été obtenue par une combinaison de suivi de pics chimiométrique automatisé et de décisions basées sur un logiciel dans AutoChrom MS. Les équations de rétention de pic correctes (c'est-à-dire le temps de rétention par rapport au rapport de phase mobile) ont été générées en utilisant d'abord des gradients en une étape avec une large gamme de % B suivis d'une optimisation dans des gradients à plusieurs étapes. Il a été constaté que l'extrapolation, à l'aide de modèles de rétention quadratiques, peut conduire à de grandes erreurs dans les prédictions du temps de rétention (tR), en particulier pour les composants mal retenus. Nous présentons les défis liés à la résolution des paires de résolution critiques, y compris celles avec le même m/z, la surestimation et les erreurs de prédiction du logiciel, et pourquoi le modèle de pics (c'est-à-dire la précision de la prédiction par rapport à l'expérimental) échoue aux extrêmes du gradient. En utilisant cette approche, nous avons pu générer une méthode chromatographique indicatrice de stabilité appropriée pour un échantillon extrêmement difficile comprenant trois principes pharmaceutiques actifs (API) et des produits de dégradation associés avec une large gamme d'hydrophobicité. Les API étaient des composés internes, leur identité est masquée dans cet article et n'est pas pertinente pour l'étude. Il y avait de bonnes correspondances entre les temps de rétention prédits et expérimentaux des pics suivis. Le modèle de pic a été utilisé pour la génération d'une méthode d'essai/de puissance en utilisant uniquement l'outil de calcul.